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文檔簡介
1、通過RT-PCR,獲得了玉米粗縮病病原湖北分離物(Hbm)基因組片段S9的全長cDNA克隆,并測定了它的全序列.Hbm-S9全長1900bp,含有兩個(gè)非重疊的開放閱讀框(ORF),ORF1起始于52-54 nt的AUG,終止于1093-1095 nt的UGA,推測編碼一個(gè)由347個(gè)氨基酸組成、分子量約為40kDa的蛋白(P9-1).ORF2起始于1160-1162nt的AUG,終止于1786-1788nt的UAA,推測編碼一個(gè)由209個(gè)
2、氨基酸組成、分子量約為24kDa的蛋白(P9-2).序列分析表明,Hbm-S9與水稻黑條矮縮病毒(RBSDV)中國不同分離物之間的核苷酸和氨基酸序列同源性分別為94.4-98.9％和96.0-99.0％.且與日本RBSDVS9的序列同源性高于與玉米粗縮病毒S8的序列同源性.此結(jié)果進(jìn)一步證明了引起中國玉米粗縮病的病原為RBSDV.另外構(gòu)建Hbm-S3-5'端、Hbm-S3-3'端的原核表達(dá)載體,分別在大腸桿菌中成功表達(dá)并純化了目標(biāo)蛋白,并
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