水稻黑條矮縮病毒外殼蛋白P10的原核表達、抗體制備及應用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、水稻黑條矮縮病毒(Rice black-streakeddwaf virus,RBSDV),是呼腸孤病毒科斐濟病毒屬成員,可引起水稻黑條矮縮病、玉米粗縮病等,對東南亞地區(qū)的水稻、玉米等作物造成了嚴重危害。目前國內外主要是依靠一些分子生物學方法(如RT-PCR和核酸雜交)檢測RBSDV,但在實際生產中這些方法的應用受到限制。分子生物學方法的不足之處是費時以及成本較高,不適于大批量樣品的檢測。本研究的主要目標是發(fā)展一種較RT-PCR方法更為

2、迅速和有效的利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測RBSDV的方法。
　　 本研究采用RT-PCR方法從感染RBSDV的水稻中克隆該病毒的外殼蛋白基因(Coat Protein,CP),CP基因再亞克隆到原核表達載體PET-32a中構建成重組原核表達載體pET32a-CP。將重組表達載體轉化大腸桿菌BL21(DE3),經IPTG誘導,Ni2+-NTA樹脂親和柱純化獲得蛋白。以純化的重組蛋白為抗原免疫兔子制備RBSDV外殼蛋白的多

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