實驗六小鼠巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象的觀察

1、實驗六 巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象的觀察,1.通過觀察小鼠巨噬細(xì)胞吞噬紅細(xì)胞的試驗，了解巨噬細(xì)胞對異物吞噬的原理和功能。2.了解巨噬細(xì)胞在機(jī)體非特異免疫中的重要作用。,一、 實驗?zāi)康?高等動物體內(nèi)的巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞，具有吞噬作用的功能。它們廣泛分布在組織和血液中，在機(jī)體的非特異免疫功能中起著重要作用。當(dāng)病原微生物或其他異物侵入機(jī)體時，能招引巨噬細(xì)胞，而巨噬細(xì)胞又有趨化性，它通過產(chǎn)生活躍的變形運動，主動向病原體和異物移行聚集，首

2、先把異物吸附在細(xì)胞表面，隨之，吸附區(qū)域的細(xì)胞膜向內(nèi)凹陷，伸出偽足包圍異物，并吞入胞質(zhì)，形成吞噬泡，繼而在細(xì)胞質(zhì)中的初級溶酶體與吞噬泡融合，形成吞噬溶酶體，把病原體殺死，異物消化分解。巨噬細(xì)胞吞噬異物的能力在一定程度上反映了機(jī)體免疫水平的高低。,二、實驗原理,單核細(xì)胞（上）和巨噬細(xì)胞（下）,單核巨噬細(xì)胞吞噬過程示意圖,巨噬細(xì)胞正在吞噬衰老的紅細(xì)胞,巨噬細(xì)胞吞噬細(xì)菌（電鏡）,,肺巨噬細(xì)胞吞噬大腸桿菌（電鏡）,,1. 儀器、用具：顯微鏡、高

3、壓滅菌鍋、解剖盤、解 剖剪、1ml注射器、吸管、載玻片、蓋玻片。2. 材料：小鼠（體重20g左右），雞血。3. 試劑： 4%臺盼藍(lán)染液：臺盼藍(lán)染粉 0.4克，加0.85%生理鹽水100ml。 6%淀粉肉湯（含0.3%臺盼藍(lán)）：牛肉膏 0.3克；蛋白胨 1.0克；氯化鈉0.5克；蒸餾水 100ml。加熱后,可加入6.0克可溶性淀粉，促使溶解，再煮沸滅菌，置40C冰箱保存，用時水浴熔

4、化，加入適量4%臺盼藍(lán)染液混勻，使呈藍(lán)色。,三、實驗儀器、材料和試劑,1. 實驗前2d，每天給小白鼠腹腔注射6%淀粉肉湯液（含臺盼藍(lán)）1ml。2.實驗前，再向腹腔注射1ml 1%雞紅細(xì)胞懸液，并輕揉腹部，使雞紅細(xì)胞懸液分散。,四、方法與步驟,3. 20-30min后，用脊椎脫臼法處死小鼠（右手抓住鼠尾，用力向后拉，左手拇指與食指同時按著鼠頭后的頸部，使脊椎與腦髓間斷開致死）。 4. 迅速剖開腹腔，用未裝針頭的注射器或吸管吸

5、取 腹腔液。,5. 取一張干凈載 玻片，滴一滴腹 腔液，蓋上蓋玻 片，放置2分鐘~3 分鐘后在顯微鏡下 鏡檢。,觀察時，將視野光線調(diào)暗。在高倍鏡下，先分辨清雞紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。雞紅細(xì)胞為淡黃色、橢圓形、有核的細(xì)胞。而數(shù)量較多、體積較大圓形或不規(guī)則的細(xì)胞，其表面有許多似毛刺裝的小突起（偽足），胞質(zhì)中有數(shù)量不等的藍(lán)色顆粒（為吞入的含臺盼藍(lán)淀粉肉湯形成的吞噬泡）即為巨噬細(xì)胞。變換視野仔細(xì)觀察巨噬細(xì)胞

6、吞噬雞紅細(xì)胞的過程?？梢娪械碾u紅細(xì)胞（一至多個）緊貼附于巨噬細(xì)胞的表面；有的巨噬細(xì)胞已將1至數(shù)個紅細(xì)胞部分吞入；有的巨噬細(xì)胞已吞入一個或幾個紅細(xì)胞在胞質(zhì)中剛剛形成橢圓形的吞噬泡；有的巨噬細(xì)胞內(nèi)的吞噬泡體積縮小，并呈現(xiàn)圓形，這是與初級溶酶體發(fā)生融合，泡內(nèi)物正在被消化分解。,五、實驗結(jié)果,六．注意事項,1、給小白鼠腹腔注射6%淀粉肉湯時要注意 進(jìn)針適度，注射量要合適。2、給小白鼠腹腔注射時，抓小鼠不要太 緊，以免小鼠死亡。