脆性x綜合征解析

1、脆性X綜合征 Fragile X Syndrome,,脆性X綜合征,概述臨床特征實驗室診斷治療預后風險評估和遺傳咨詢產前診斷典型病例,概述,脆性X綜合征,又稱Martin-Bell綜合征(三核苷酸重復病)最常見的X連鎖的單基因性智力低下綜合征（OMIM 309550）　發(fā)病率僅次于21-三體綜合征群體發(fā)病率：男性全突變率1：4000，女性全突變率1：6000-8000男性前突

2、變攜帶者1:800 女性前途變攜帶者1:260臺灣篩查10046例男性新生兒發(fā)現(xiàn)全突變1例,臨床特征——FXS（1）,智力障礙 男性患者大多數都表現(xiàn)為中度至重度智力障，這與甲基化嵌合體及前突變/全突變嵌合體有關 約有30%-50%的女性全突變攜帶者患病，大多數表現(xiàn)為難以覺察的或輕度的智力障礙，女性全突變攜帶者是否患病及患者智力障礙的差異是由于X染色體差異性失活所致。,臨床特征——FXS（2）,

3、特殊面容 顏面瘦長 前額突出 耳朵大 下巴前突 下頜大 嘴大唇厚 上門齒長 腭弓高 頭圍大巨睪 青春期后表現(xiàn)明顯,,臨床特征——FXS（3）,語言障礙 許多患者都具有與智力水平相應的語言障礙，較差的聽力和記憶力，有的患者在受到刺激時，不僅詞語少、吐詞不清，而且沒有正確的語言表達形式，有的還有輕度的發(fā)音缺陷、典型口吃。行為異常 可分為截然不同的兩類：一類表現(xiàn)為

4、膽怯、憂慮、性情孤僻、表現(xiàn)禮貌、且有一定技能；另一類則表情歡快、好動、情緒煩躁、手勢能力增強，甚至行為暴躁。孤獨癥樣行為 如目光回避、觸覺障礙和重復性動作。,脆性X評分標準,臨床特征——FXS（4）,結締組織異常 皮膚松軟，張力減弱，關節(jié)松弛過度伸展，扁平足，關節(jié)脫位，二尖瓣脫垂等神經內分泌功能障礙癥狀 出生過重、巨頭、身材過長等過度生長表現(xiàn)其它: 斜視、癲癇,臨床特征——FXTAS（1）,脆性X相關

5、性震顫共濟失調綜合征（FXTAS）遲發(fā)的進行性小腦性共濟失調和意向震顫 認知能力衰退，包括記憶喪失，行為困難，焦慮，孤僻，癡呆，震顫性麻痹，周圍神經病變，下肢近端肌無力和自主機能障礙等男性前突變攜帶者患FXTAS風險隨年齡增加而增加女性患者少見,臨床特征——FXTAS（2）,不同年齡FMR1前突變男性攜帶者患FXTAS的風險,攜帶FMR1前突變母親傳遞全突變至下一代的風險,臨床特征——FXPOI（1）,脆性X相關原發(fā)性卵巢功能不

6、全（FXPOI）：40歲前出現(xiàn)卵巢功能衰退的癥狀如閉經、骨質疏松、焦慮、注意力不集中等,臨床特征——FXPOI（2）,不同CGG重復數的FXPOI患病優(yōu)勢比,遺傳病理學——發(fā)展背景,1943年Martin和Bell首次報道1969年Lubs在2個具X連鎖智力低下的無血緣關系的家系中，發(fā)現(xiàn) 均帶有一條長臂末端具隨體樣結構的C組染色體，并經放射自顯影證實為X染色體，稱為“標記X染色體”1977年Sutherland，定位于Xq27，并命

7、名為脆性部位（fragile site），脆性X綜合征因此得名1991年Verkerk等在Xq27.3附近克隆了脆性X綜合征致病基因，命名為脆性X智力低下基因1---FMR1,遺傳病理學——FMR1基因,FMR1（Fragile X Mental Retardation 1） 定位Xq27.3，全長約38kb，17個外顯子和16個內含子 5‘UTR有一個(CGG)n 三核苷酸串聯(lián)重復序列，重復序列中每9-10個CGG重復

8、有1個AGG嵌入，(CGG)n 在重復片段長度和AGG嵌入模式上都存在多態(tài)性，在其上游大約250bp處有一個CpG島。,CpG島主要位于基因的啟動子和 第一外顯子區(qū)域約有60％以上基因的含有CpG島其甲基化會導致基因沉默,遺傳病理學——FMRP蛋白,結構：RNA的功能片段、細胞核輸出訊號區(qū)段、細胞核定位訊號區(qū)段作用： FMRP是一種RNA結合蛋白，能夠和特定的mRNA結合，并將之從細胞核攜帶運輸至細胞漿特定的位置翻譯，可以在細

9、胞核和細胞漿之間來回穿梭，是一種調控蛋白質合成的翻譯抑制劑，影響神經細胞突觸的可塑性。,脆性X智力低下蛋白（FMRP）,遺傳病理學—(CGG)n動態(tài)突變,正常等位基因： n=5-44過渡區(qū)等位基因:也稱”灰區(qū)” n=45-54前突變等位基因: n=55-200 全突變等位基因： n>200-230,遺傳病理學—(CGG)n動態(tài)突變,遺傳病理

10、學—動態(tài)突變比較,,mRNA毒性,遺傳病理學—嵌合體,15-20%的脆性X綜合征存在嵌合現(xiàn)象：大小嵌合 體細胞中前突變與全突變嵌合甲基化嵌合 基因超甲基化與非甲基化嵌合,實驗室診斷——檢測策略,參考 ACMG Guidline,實驗室診斷——檢測方法（1）,細胞遺傳學檢測技術： 常規(guī)G顯帶高分辨染色體核型分析 排出染色體異常 脆性X染色體檢測技

11、術 特異性、敏感性均低，不做首選方法,染色體 光鏡和電鏡圖示,,實驗室診斷——檢測方法（2）,分子遺傳學檢測技術（ACMG）： PCR(CGG)n直接擴增法 Southern 基因組印跡法,實驗室診斷——檢測方法（3）,可選擇的檢測方法: RT-PCR 長鏈PCR 甲基化特異性三重PCR

12、 細胞免疫化學方法可以檢測FMRP FISH、序列分析等 Plus 對于有典型臨床表現(xiàn)的病人外周血檢查陰性，可以考慮換其他組織（如皮膚）檢查可能得到陽性結果,實驗室診斷——本室檢測方法,PCR (CGG)n直接擴增法印跡雜交southern blot,FMR1基因PCR產物結果分析,,1泳道：正常男性，29個CGG重復2泳道：正常女性，28和30個CGG重

13、復3泳道：女性灰區(qū)基因攜帶者，50和19個CGG重復4泳道：女性前突變，84和22個CGG重復5泳道：男性前突變，76個CGG重復6泳道：男性全突變，沒有正常帶，需要Southern基因組印跡分析,1泳道：正常男性2泳道：正常女性，一條甲基化帶（位于失活X染色體上），一條非甲基化帶（位于活性X染色體上）3泳道：男性前突變，75個CGG重復（結合PCR分析所得）4泳道：女性前突變，攜帶有92個CGG重復（結合PCR分析所得）

14、5泳道：男性全突變，攜帶有三種重復920、430和280個CGG重復6泳道：女性全突變，攜帶有355個CGG重復7泳道：男性前突變/全突變嵌合體，攜帶有510和84個CGG重復（結合PCR分析）,,治療處理（1）,脆性X綜合征：沒有特異性治療ａ、早期特殊教育訓練，可以采用結構化的學習環(huán)境和行為管理措施，行為矯正技術，語言訓練等對患兒的癥狀可以有明顯的改善作用。 ｂ、行為異常可以適當用藥物控制，但用藥要個體化并且要嚴密的監(jiān)測，并

15、且療效不顯著 。ｃ、對于有斜視、癲癇、二尖瓣脫垂等癥狀的患者給予相應的專科治療。d、葉酸，療效不確切。,治療處理（2）,脆性X震顫/共濟失調綜合征： 沒有特異性的治療，注意日常生活的支持護理 脆性X相關性原發(fā)性卵巢功能不全： 有特異性的治療，結合激素水平評估和生育要求給予相應婦產科處理,遺傳咨詢與風險評估（1）,對于脆性X綜合征患者及其家庭的咨詢1） 全突變患者母親為前突變攜帶者或全突變

16、攜帶者/患者。2） 若母親為全突變攜帶者或患者，則其女兒有50%的幾率遺傳得其母親的全突變等位基因，其中又有50%的患病概率。而男孩有50%的幾率為患者。3）男性全突變患者多數不能生育，極少數全突變患者和鑲嵌性突變患者可能生育4） 全突變患者母親的姐妹可能為前突變或全突變的攜帶者， 其兄弟可能為前突變攜帶者。5） 全突變患者的外祖父母可能為前突變或灰區(qū)基因的攜帶者，注意有無FXTAS和FXPOI相關癥狀,遺傳咨詢與風險評估（2）

17、,對于攜帶者的咨詢 1）男性前突變攜帶者在向下一代傳遞時重復順序一般不擴增 2）女性前突變攜帶者可能生育脆性X綜合征患兒，其前突變基因是否穩(wěn)定取決于其重復序列中(CGG)n的重復數 3）男性前突變攜帶者有患FXTAS的風險 4）女性前突變攜帶者有患FXPOI的風險，應告知女性前突變攜帶者，可能生育年限會縮短，便于家庭和職業(yè)的選擇規(guī)劃。,,遺傳咨詢與風險評估（3）,灰區(qū)基因攜帶者的咨詢正常人群中約有1/100-1

18、/50的人為灰區(qū)基因攜帶者灰區(qū)基因攜帶者不會發(fā)病，其下一代子女也不會是脆性X綜合征患者，灰區(qū)基因有一定的擴增風險，在傳遞給子代時有可能擴增為前突變，在更遠的世代中有可能擴增為全突變而發(fā)病灰區(qū)基因攜帶者不需要進行產前診斷。,遺傳咨詢與風險評估（4）,產前診斷：　 對象： 曾生育過脆性X綜合征患兒的孕婦 證實為前突變攜帶者的孕婦 取樣： 羊水穿刺