響應(yīng)面法優(yōu)化閃式提取羅漢松總黃酮及其抗氧化活性

1、響應(yīng)面法優(yōu)化閃式提取羅漢松總黃酮及響應(yīng)面法優(yōu)化閃式提取羅漢松總黃酮及其抗氧化活性抗氧化活性王全澤1，袁堂豐1，劉磊磊12，王歡1，郭婕12(1.吉首大學(xué)林產(chǎn)化工工程湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南張家界427000；2.湖南省植物功能成分利用協(xié)同創(chuàng)新中心，湖南長(zhǎng)沙410428)摘要：該文對(duì)羅漢松總黃酮提取工藝及其抗氧化活性進(jìn)行了研究，采用閃式提取法提取羅漢松總黃酮，并通過單因素法和響應(yīng)面優(yōu)化方法，同時(shí)考察了羅漢松總黃酮對(duì)DPPH?、O2?和?OH

2、自由基清除作用。結(jié)果表明，閃式提取羅漢松總黃酮最佳工藝條件為：乙醇體積分?jǐn)?shù)71%、料液比1:36(gmL)、提取時(shí)間53s、提取電壓為75V時(shí)，羅漢松總黃酮提取率為8.147%。羅漢松總黃酮對(duì)DPPH?、O2?和?OH自由基具有明顯的清除能力，最大清除率分別達(dá)到87.13%、58.24%和67.56%，為羅漢松的綜合開發(fā)利用提供了參考。關(guān)鍵字關(guān)鍵字：羅漢松；總黃酮；閃式提?。豢寡趸钚?；中圖分類號(hào)：中圖分類號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：文

3、獻(xiàn)標(biāo)志碼：AOptimizationofFlashExtractionofFlavonoidsfromLeavesofPodocarpusMacrophyllusbyResponseSurfaceMethodAntioxidantActivityWangQuanze1，YuanTangfeng1，LiuLeilei12WangHuan1，GuoJie12(1KeyLabatyofHunanFestProductChemicalIndus

4、tryEngineeringJishouUniversityZhangjiajie427000ChinaHunan2.HunanCoInnovationCenterfUtilizationofBotanicalFunctionalIngredientsChangsha410428HunanChina)Abstract1：TheflashextractionoftotalflavonoidsfromtheleavesofPodocarpu

5、smacrophyllushasbeenoptimizedbyresponsesurfacemethodantioxidantactivitieswerestudied.ThedesignofextractionoftotalflavonoidsisfromBoxBehnkencentralcompositeexperiment，atthesametimethescavengingactivitiesonDPPH?、O2??OHfree

6、radicalofthetotalflavonoidsofPodocarpusmacrophyllusweremeasured.TheresultsshowthattheextractionrateoftotalflavonoidsofPodocarpusmacrophylluswas8.147%，theoptimumconditionswereobtainedasfollows:theethanolconcentrationwas71

7、%，thematerialliquidratio1:36(gmL)，theextractiontimeis53sthevoltageis75V.Totalflavonoidsof1收稿日期：接受日期：基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金地區(qū)項(xiàng)目（31560105）；湖南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(14JJ6036)；張家界市科技發(fā)展專項(xiàng)（2014YB16）；吉首大學(xué)2012年人才引進(jìn)專項(xiàng)(jsdxrcyjkyxm2012)作者簡(jiǎn)介：王全澤(1992)，男

8、，碩士研究生，電話：13257447707，Email：465183659@。通訊作者：郭婕(1982)，女，博士，副教授，電話:15074448905，Email:xyxdyd@。1.2.1羅漢松總黃酮的測(cè)定1.2.1.1溶液制備精密稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品25.62mg，置于50mL容量瓶中，用體積分?jǐn)?shù)為70%乙醇溶液溶解、定容至刻度線，搖勻，配制成0.5124gL蘆丁對(duì)照品儲(chǔ)備液，備用。精密稱取干燥的羅漢松葉樣品1.0g，用一定體積分?jǐn)?shù)的乙

9、醇溶液按一定的料液比和提取電壓在閃式提取器中提取一定時(shí)間，經(jīng)離心、過濾后，將所得溶液用體積分?jǐn)?shù)70%的乙醇定容至50mL容量瓶中，搖勻，得到樣品溶液。1.2.1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制采用NaNO2Al(NO3)3比色法[18]，分別量取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液置于10mL容量瓶中，各加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的亞硝酸鈉溶液0.2mL，搖勻，靜置5min，再分別加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的硝酸鋁溶液0.2mL，搖勻

10、。靜置5min，最后分別加入1.0mmolL氫氧化鈉溶液2.0mL，搖勻，靜置15min，用蒸餾水定容至刻度線，搖勻于506nm波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光度值，繪制以蘆丁對(duì)照品溶液質(zhì)量濃度(X，mgmL)為橫坐標(biāo)，吸光度(Y)為縱坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。1.2.1.3羅漢松總黃酮得率的計(jì)算精確量取0.2mL樣品溶液于10mL容量瓶中，按“1.2.1.2”節(jié)方法測(cè)定吸光度，帶入回歸方程，求出樣品溶液中總黃酮濃度，并按下式計(jì)算總黃酮得率。%1001??mVP

11、y其中：P1—羅漢松葉粉末提取液中總黃酮質(zhì)量濃度，gmL；V—提取液體積，mL；m—羅漢松葉粉末質(zhì)量，g。1.2.2單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)在一定的條件下，分別考察乙醇體積分?jǐn)?shù)(A)、料液比(B)、提取時(shí)間(C)、提取電壓(D)對(duì)羅漢松總黃酮得率的影響。1.2.3響應(yīng)面分析實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，選定合適的工藝參數(shù)采用BoxBehnken設(shè)計(jì)方案，以乙醇體積分?jǐn)?shù)(A)、料液比(B)、提取時(shí)間(C)、提取電壓(D)為自變量，以總黃酮的得率Y設(shè)計(jì)