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文檔簡介
1、目的:1型糖尿病是由于胰島細胞自身免疫損傷導致的單一蛋白質(zhì)胰島素絕對缺乏的一種代謝障礙性疾病,從而成為基因治療的適應癥.但是無序的胰島素基因分泌不能使血糖保持在穩(wěn)定的生理范圍內(nèi),并產(chǎn)生極大的低血糖的危險.通過胰島素生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)插入到從鼠的肝臟中丙酮酸激酶(rLPK)的基因中提取的葡萄糖反應元件(GLRE)聚合成三倍體(GLRE)3的下游,我們構建了一個胰島素基因調(diào)控系統(tǒng),分別受胰島素抑制、葡萄糖激活,從而為構建可
2、調(diào)控的胰島素表達載體奠定基礎.該試驗的目的是1:掌握從組織中提取DNA及PCR擴增目的DNA技術.2:掌握基因重組技術及鑒定方法.3:構建重組的含胰島素基因調(diào)控系統(tǒng)的載體,為糖尿病基因治療的進一步實驗奠定基礎.結論:1.可運用飽和氯化納法從肝臟組織中調(diào)取基因組DNA;運用PCR方法從肝臟基因組DNA中調(diào)取目的DNA:IGFBP-1;并運用基因重組技術構建攜胰島素調(diào)控基因系統(tǒng)的載體.2.酶切電泳、PCR及測序鑒定重組體中IGFBP-1基因
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