2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、細(xì)胞色素 P450(P450)是多功能氧化酶的核心酶系,參與昆蟲殺蟲劑的代謝以及蛻皮激素、保幼激素等激素的合成,與昆蟲的生長、發(fā)育和防御密切相關(guān)。另外,這些酶與過氧化物酶有類似的活性,因此可能在保護(hù)生物體免受活性氧損傷的過程中發(fā)揮作用。本研究以我國特色種質(zhì)資源中華蜜蜂(Apis cerana cerana)為實驗材料,根據(jù)意大利蜜蜂(Apis mellifera)的同源序列,利用RT-PCR和RACE-PCR的方法從中華蜜蜂中首次克隆得

2、到了P450家族CYP3分支和CYP2分支的CYP336A1和CYP18A1兩個基因,并且分別命名為AccCYP336A1和AccCYP18A1。然后進(jìn)一步對它們進(jìn)行了序列比對、表達(dá)特性分析以及功能預(yù)測。具體的結(jié)果如下:
  (1)AccCYP336A1開放閱讀框全長1491bp,編碼一個含有496個氨基酸殘基的蛋白質(zhì),分子質(zhì)量為57kDa,等電點為8.8。AccCYP18A1開放閱讀框全長1620bp,編碼一個含有539個氨基酸

3、殘基的蛋白質(zhì),分子質(zhì)量為60.7kDa,等電點為8.42。氨基酸序列比對發(fā)現(xiàn),AccCYP336A1、AccCYP18A1與其他物種中P450家族基因的同源性較高,且具有該家族保守的功能區(qū)域。進(jìn)化樹分析發(fā)現(xiàn),AccCYP336A1和AccCYP18A1分別屬于CYP3分支和CYP2分支。
  (2)采用qRT-PCR的方法分別對兩個基因在中華蜜蜂不同發(fā)育時期和不同組織部位中的表達(dá)特性進(jìn)行了分析。qRT-PCR結(jié)果表明,AccCYP

4、336A1和AccCYP18A1在整個中華蜜蜂的變態(tài)發(fā)育過程中均有表達(dá),AccCYP336A1在卵期的表達(dá)量最高,而AccCYP18A1在變態(tài)發(fā)育的兩個重要發(fā)育節(jié)點:5日齡幼蟲(L5)及1日齡成蜂(A1)時期表達(dá)量最高。以上結(jié)果表明,AccCYP336A1及 AccCYP18A1可能與中華蜜蜂的變態(tài)發(fā)育有關(guān)。另外,中華蜜蜂不同組織部位中的表達(dá)特性顯示,AccCYP336A1在表皮中表達(dá)量最高,而AccCYP18A1在中腸中表達(dá)量最高。這

5、些結(jié)果初步表明了兩個基因的組織特異性。
 ?。?)采用qRT-PCR的方法分別對兩個基因在不同非生物應(yīng)激中的表達(dá)模式進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,AccCYP336A1、AccCYP18A1兩個基因的表達(dá)受高溫、低溫、紫外線和殺蟲劑等非生物應(yīng)激的誘導(dǎo)。這些結(jié)果表明,這兩個基因在中華蜜蜂抗逆、抗氧化過程中起到重要作用。
 ?。?)采用Western-blot的方法分別對兩個基因所編碼蛋白在不同非生物應(yīng)激中的表達(dá)特性進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示

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