紅翎菜科三種海藻原生質體分離培養(yǎng)及外植體發(fā)育模式研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、紅翎菜科海藻是生產卡拉膠的主要原料,被廣泛應用于紡織品、食品等方面,此外還具有很高的藥用價值、經濟價值及重要的生態(tài)意義。紅翎菜科海藻大部分為野生種,野生資源也日益減少,目前,我國卡拉膠原料藻仍主要依賴于東南亞國家進口,開展紅翎菜科海藻苗種繁育技術和遺傳改良研究工作已成為我國卡拉膠產業(yè)自主發(fā)展的急需。
   原生質體的分離培養(yǎng)是一類重要的植物細胞工程研究技術。原生質體無細胞壁障礙,是一類重要的生物學研究工具材料,可廣泛應用于細胞生

2、物學、體細胞雜交育種、遺傳轉化以及基因定位等研究。海藻原生質體的分離制備多采用酶法,鑒定常采用熒光增白劑染色法和Evans Blue染色法。本文選取紅翎菜科兩種生態(tài)型的長心卡帕藻(Kappaphycus alvarezii)和麒麟菜(Eucheuma denticulatum)共三種海藻的幼嫩藻體,運用纖維素酶、鮑酶和海螺酶進行酶解,均成功制得原生質體,其中20%鮑酶與12%纖維素酶混合酶制得的原生質體產量達到105個/g以上,分別為(

3、64.20±2.80)×104個/g、(76.80±3.20)×104個/g和(67.80±2.40)×104個/g,顯示出纖維素酶與鮑酶這一工具酶組合對原生質體高效制備的良好適用性。在2.0 mol/L葡萄糖滲透劑、30℃黑暗酶解4.0 h的最適酶解條件下,長心卡帕藻原生質體存活率為(49.34±0.12)%。相較于前人研究,本實驗結果在酶解效率和產量上均有非常顯著的提高。
   海藻細胞具有全能性,在適當條件下,細胞、組織均

4、可以分化發(fā)育為新個體,這為研究海藻的形態(tài)發(fā)生、遺傳育種及生活史控制等問題開辟了新的途徑,并可通過體細胞及組織快繁培育經濟海藻苗種。本文對長心卡帕藻(Kappaphycusalvarezii)原生質體進行了再生培養(yǎng),發(fā)現長心卡帕藻原生質體有體細胞團和再生植株兩種發(fā)育分化途徑,并獲得原生質體細胞再生苗。在長心卡帕藻酶解后的組織塊和外植體再生培養(yǎng)研究中,發(fā)現酶解后的組織塊出現兩種發(fā)育途徑:一種是酶解后組織塊進行了再生新芽的發(fā)育,即在培養(yǎng)65

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