基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1的受體CXCR7對(duì)HeLa細(xì)胞增殖、粘附和侵襲能力的影響.pdf

1、宮頸癌是全球高發(fā)的女性惡性腫瘤之一，其發(fā)病率位居于第二位，僅次于乳腺癌。宮頸癌患者的預(yù)后與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移已成為提高患者生存率的主要障礙。因此研究宮頸癌轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制，探尋能夠治療宮頸癌的潛在靶點(diǎn)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義?；|(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor1，SDF-1)及其受體在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著重要的調(diào)控作用。以往的研究認(rèn)為SDF-1只通過(guò)其唯一的受體CXCR4(chemok

2、ine receptor4)起作用。然而，近年來(lái)的研究卻發(fā)現(xiàn)，SDF-1還存在另一獨(dú)立的受體：CXCR7(chemokine receptor7)，CXCR7在多種腫瘤細(xì)胞中均有表達(dá)，并且已有的研究發(fā)現(xiàn)SDF-1/CXCR7生物軸在腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中起著重要的調(diào)控作用，但是對(duì)于不同的研究模型，其具體功能卻有所差異。已有研究發(fā)現(xiàn)CXCR7在HeLa細(xì)胞中也有表達(dá)，但其作用目前尚未明確。本研究以人宮頸癌細(xì)胞為研究對(duì)象，采用CXCR7和CX

3、CR4的小分子拮抗劑CCX733及AMD3100進(jìn)行體外拮抗抑制處理，考察CXCR7對(duì)SDF-1誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞增殖、粘附和侵襲能力的影響，以闡明SDF-1/CXCR7軸在宮頸癌發(fā)生轉(zhuǎn)移中的作用，以期為宮頸癌的治療提供新的作用靶點(diǎn)。本文的研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：
　　 ①運(yùn)用Western blotting免疫印跡法檢測(cè)人宮頸癌HeLa細(xì)胞中CXCR4和ICXCR7在蛋白水平上的表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)CXCR4和CXCR7在HeLa細(xì)胞

4、的蛋白水平上均有表達(dá)。
　　 ②小分子拮抗劑阻斷CXCR7和CXCR4之后，采用MTT法檢測(cè)對(duì)SDF-1誘導(dǎo)的HeLa細(xì)胞增殖的影響；通過(guò)體外粘附實(shí)驗(yàn)考察其對(duì)SDF-1誘導(dǎo)的HeLa細(xì)胞與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)之間的粘附作用；通過(guò)Transwell小室體外侵襲實(shí)驗(yàn)考察SDF-1誘導(dǎo)的HeLa細(xì)胞的侵襲能力的影響，并采用明膠酶譜法檢測(cè)SDF-1對(duì)HeLa細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2的影響。結(jié)果顯示：SDF-1可以顯著提

5、高HeLa細(xì)胞的增殖、粘附以及侵襲能力，并且可以提高HeLa細(xì)胞分泌MMP-2的能力。阻斷CXCR7或CXCR4后，SDF-1誘導(dǎo)的HeLa細(xì)胞增殖和與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附能力均顯著下降，并且單獨(dú)阻斷CXCR7的抑制效果更為明顯，說(shuō)明在SDF-1誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞的增殖和與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附過(guò)程中，CXCR7可能起著主要的作用。阻斷CXCR7或CXCR4后，SDF-1誘導(dǎo)的HeLa細(xì)胞的侵襲能力顯著下降，并且單獨(dú)阻斷CXCR4的抑制效果更為明顯，說(shuō)

6、明在SDF-1誘導(dǎo)的HeLa細(xì)胞的侵襲過(guò)程中，CXCR4可能起著主要作用。
　　 結(jié)論：CXCR7和CXCR4均表達(dá)于HeLa細(xì)胞中。SDF-1可以顯著提高HeLa細(xì)胞的增殖、粘附及侵襲能力，并且可以提高HeLa細(xì)胞分泌MMP-2的能力。阻斷CXCR7或CXCR4后，SDF-1誘導(dǎo)的HeLa細(xì)胞增殖、與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附和侵襲能力均被阻斷。結(jié)果提示CXCR7在SDF-1誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞增殖、與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附和侵襲過(guò)程中起著重要作用，