2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
　　觀察siRNA干擾質(zhì)粒轉(zhuǎn)入銅綠假單胞菌后,MexB蛋白表達(dá)量的變化。
　　方法:
　　針對(duì)mexB基因設(shè)計(jì)合成特異性siRNA分子,與pGPU6/GFP/Neo載體連接,構(gòu)建pGPU6/GFP/Neo-siRNA重組質(zhì)粒。構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pET22b+/mexB,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)plysS,誘導(dǎo)表達(dá)MexB蛋白,蛋白純化后免疫家兔制備多克隆抗體。siRNA質(zhì)粒分別電轉(zhuǎn)化銅綠假單胞菌野生株、臨

2、床耐藥株及mexB基因高表達(dá)株,運(yùn)用westernblot觀察轉(zhuǎn)化8h、12h、24h后,MexB蛋白表達(dá)量的變化。
　　結(jié)果:
　　成功構(gòu)建pGPU6/GFP/Neo-siRNA重組質(zhì)粒。成功表達(dá)銅綠假單胞菌外排泵蛋白MexB,并制備多克隆兔抗。siRNA質(zhì)粒對(duì)銅綠假單胞菌野生菌、臨床耐藥株及mexB基因高表達(dá)株的mexB基因均具有良好的沉默效果,而且沉默效果存在時(shí)間差異性。
　　結(jié)論:
　　siRNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)化

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