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1、本論文主旨在研究降膽固醇藥阿托伐他汀與降糖藥二甲雙胍聯(lián)合或與鎮(zhèn)靜劑咖啡因聯(lián)合抑制前列腺癌的作用及機(jī)理。
第一部分:對(duì)降膽固醇藥阿托伐他汀與降糖藥二甲雙胍聯(lián)合抑制前列腺癌PC-3細(xì)胞株的體內(nèi)外研究,使用臺(tái)盼藍(lán)染拒實(shí)驗(yàn)檢測(cè)聯(lián)合用藥對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制的作用,用碘化丙啶熒光染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,由熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)NF-κB活性,用細(xì)胞劃痕法檢測(cè)細(xì)胞遷移,用無血清懸浮成球法檢測(cè)對(duì)干細(xì)胞成球作用。利用Westernblotting以檢測(cè)調(diào)控
2、前列腺癌蛋白phospho-Akt,phospho-Erk1/2以及Survivin表達(dá)水平。最后通過前列腺癌腫瘤小鼠模型來評(píng)估對(duì)體內(nèi)腫瘤的影響。研究表明,二甲雙胍與阿托伐他汀聯(lián)合使用較單獨(dú)用藥有顯著的抑癌效果。對(duì)比兩種藥物分別單獨(dú)給藥,阿托伐他汀與二甲雙胍聯(lián)合使用,對(duì)前列腺癌細(xì)胞更為顯著的生長(zhǎng)抑制和誘導(dǎo)凋亡作用,抑制遷移能力和成球能力。通過抑制NF-κB基因轉(zhuǎn)錄,下調(diào)phospho-Akt,phospho-Erk1/2以及Surviv
3、in表達(dá)水平,達(dá)到聯(lián)合使用有效的抑癌效果。發(fā)現(xiàn)阿托伐他汀與二甲雙胍聯(lián)合用藥作用腫瘤異種移植小鼠的前列腺癌,相較之兩種藥物分別單獨(dú)給藥,表現(xiàn)出更強(qiáng)地抑制效果。
第二部分:對(duì)降膽固醇阿托伐他汀與鎮(zhèn)靜劑咖啡因聯(lián)合抑制前列腺癌PC-3細(xì)胞株前列腺癌的研究。使用臺(tái)盼藍(lán)染拒實(shí)驗(yàn)檢測(cè)聯(lián)合用藥對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制的作用,用細(xì)胞株克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力,用碘化丙啶熒光染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,用細(xì)胞劃痕法結(jié)合Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能
4、力,用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力,用無血清懸浮成球法檢測(cè)對(duì)干細(xì)胞成球作用。最后利用Westernblotting以檢測(cè)調(diào)控前列腺癌蛋白phospho-Akt、phospho-Erk1/2、Bcl-2以及Survivin表達(dá)水平。研究表明,咖啡因與阿托伐他汀聯(lián)合使用較單獨(dú)用藥有顯著的抑癌效果。對(duì)比兩種藥物分別單獨(dú)給藥,降膽固醇藥阿托伐他汀與鎮(zhèn)靜劑咖啡因聯(lián)合使用,對(duì)前列腺癌細(xì)胞更為顯著的生長(zhǎng)抑制、遷移抑制、侵襲抑制、成球能力
5、減弱以及誘導(dǎo)凋亡的作用。通過下調(diào)phospho-Akt、phospho-Erk1/2、Bcl-2以及Survivin表達(dá)水平,達(dá)到二甲雙胍與阿托伐他汀聯(lián)合使用有效的抑癌效果。
本研究首次揭示了降膽固醇藥阿托伐他汀與降糖藥二甲雙胍聯(lián)合或與鎮(zhèn)靜劑咖啡因聯(lián)合抑制前列腺癌的的影響。發(fā)現(xiàn)降膽固醇藥物阿托伐他汀與二甲雙胍聯(lián)合或與咖啡因聯(lián)合都能增強(qiáng)抑制的效果,減少的毒副作用及耐藥性,可稱為一種全新的更為有效的治療前列腺癌的方向。藥物聯(lián)合使用
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