攜帶ApoJ基因的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療大鼠腦出血模型的研究.pdf

1、目的：探討攜帶ApoJ基因的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性腦出血的治療作用。
　　方法：采取脂質(zhì)體介導(dǎo)用重組質(zhì)粒pEGFP-N1-apoJ轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs），分別于轉(zhuǎn)染后24，48，72，96h在熒光顯微鏡下觀察相同體積脂質(zhì)體介導(dǎo)不同重組質(zhì)粒量的轉(zhuǎn)染效果，篩選出轉(zhuǎn)染率最高的轉(zhuǎn)染組。將102只雄性SD大鼠隨機(jī)分為轉(zhuǎn)染組、BMSCs組和NaCl組。每組再分為24h，48h，72h，96h四個(gè)亞組。利用腦立體定位

2、儀建立大鼠腦出血模型，三組分別于造模24h后顱內(nèi)注射等體積的轉(zhuǎn)染細(xì)胞懸液、BMSCs懸液和生理鹽水，分別于處理后24h，48h，72h，96h處死各對(duì)應(yīng)亞組大鼠。進(jìn)行各時(shí)間點(diǎn)改良神經(jīng)功能評(píng)分（mNSS）；用干濕質(zhì)量法測量腦組織含水量；用蛋白免疫印跡法檢測載脂蛋白-J在各時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.等體積脂質(zhì)體條件下，四個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)染組（重組質(zhì)粒量分別為0.8錯(cuò)誤!未找到引用源。、1.2錯(cuò)誤!未找到引用源。、1.6錯(cuò)誤!未找到引用源。

3、、2.0錯(cuò)誤!未找到引用源。）在72h時(shí)轉(zhuǎn)染率高于同組在24h，48h，96h的轉(zhuǎn)染率（P均＜0.05）；且與另外三個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)染組（重組質(zhì)粒量分別為0.8錯(cuò)誤!未找到引用源。、1.2錯(cuò)誤!未找到引用源。、2.0錯(cuò)誤!未找到引用源。）比較，重組質(zhì)粒量為1.6錯(cuò)誤!未找到引用源。的細(xì)胞轉(zhuǎn)染組在72h時(shí)熒光表達(dá)最強(qiáng)，轉(zhuǎn)染效率高于同時(shí)間點(diǎn)的其他三組（P均＜0.05）；2. mNSS結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染組在實(shí)驗(yàn)干預(yù)后1，3，5，7d得分顯著低于同時(shí)間點(diǎn)的

4、BMSCs組與NaCl組（P均＜0.05）；3.腦組織含水量測定結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染組在1，3，5，7d腦組織含水量低于同時(shí)間點(diǎn)的BMSCs組與NaCl組（P均＜0.05）；4.Western blot結(jié)果顯示，與BMSCs組與NaCl組比較，轉(zhuǎn)染組腦組織內(nèi)ApoJ表達(dá)水平均高于同時(shí)間點(diǎn)的兩組（P均＜0.05）。
　　結(jié)論：攜帶ApoJ基因的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞能夠在ICH大鼠腦組織內(nèi)表達(dá)載脂蛋白J，外源性ApoJ對(duì)腦出血具有治療作用，可以