天麻鉤藤飲對大鼠氨氯地平代謝的影響以及布比卡因增強(qiáng)大鼠主動脈苯腎上腺素收縮反應(yīng)的研究.pdf

1、氨氯地平為第三代二氫吡啶類Ca2+通道阻滯藥，是臨床治療高血壓病的一線藥物，作用機(jī)制為選擇性地作用于細(xì)胞膜上的Ca2+通道，抑制Ca2+內(nèi)流，進(jìn)而擴(kuò)張血管平滑肌，達(dá)到降壓的目的。氨氯地平適用于伴有慢性心衰的高血壓和冠心病患者的治療；據(jù)報道該藥能改善心衰患者的癥狀并降低死亡率；對于正在使用洋地黃類強(qiáng)心藥、利尿藥和ACEI的嚴(yán)重慢性心衰患者，聯(lián)合應(yīng)用氨氯地平，未見心血管并發(fā)癥和死亡率增加。伴有腎功能受損者使用氨氯地平時，不須調(diào)整用藥劑量。<

2、br>　　天麻鉤藤飲為中藥降壓的經(jīng)典方劑，臨床上經(jīng)常作為輔助降壓藥物使用。據(jù)國外研究報道，80％的高血壓患者需要聯(lián)合應(yīng)用2種或2種以上的抗高血壓藥物才能起到穩(wěn)定血壓的作用。我國臨床上降壓藥的聯(lián)合應(yīng)用已成為治療高血壓病的常規(guī)用藥方案。中藥復(fù)方制劑聯(lián)合西藥治療高血壓已成為一種較普遍的治療方案。中藥成分復(fù)雜，中西藥聯(lián)用時藥代動力學(xué)的相互作用更為復(fù)雜；因此，研究中西藥聯(lián)用時藥代動力學(xué)的改變具有重要的意義。本文利用 LC-MS/MS技術(shù)，分析了天

3、麻鉤藤飲復(fù)方制劑對氨氯地平及其代謝產(chǎn)物在大鼠體內(nèi)藥物代謝的影響。
　　布比卡因（BUP）是臨床最常用的局麻藥之一。在之前的研究中發(fā)現(xiàn)，大鼠離體胸主動脈暴露于臨床濃度的BUP后，α1受體介導(dǎo)的收縮反應(yīng)呈現(xiàn)早期增強(qiáng)和長期抑制兩種效應(yīng)。但BUP增強(qiáng)α1受體介導(dǎo)血管收縮反應(yīng)的作用機(jī)制尚不清楚。本文采用大鼠離體胸主動脈環(huán)，觀察BUP增強(qiáng)α1受體介導(dǎo)血管收縮反應(yīng)的變化；同時借助藥理學(xué)工具藥，分析血管內(nèi)皮舒血管因子在BUP增強(qiáng)α1受體介導(dǎo)血管收

4、縮反應(yīng)中的作用。
　　第一部分天麻鉤藤飲對大鼠氨氯地平代謝的影響
　　目的：建立抗高血壓藥物氨氯地平及其代謝產(chǎn)物的LC-MS/MS測定方法，分析天麻鉤藤飲中藥復(fù)方制劑對氨氯地平及其代謝產(chǎn)物的藥動學(xué)影響。
　　方法：將健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為對照組和實驗組。實驗組大鼠灌胃給予天麻鉤藤飲（0.5 g/kg，1次/日），對照組大鼠給予等體積蒸餾水，連續(xù)灌胃15天。最后一日灌胃后兩組大鼠均灌胃給予氨氯地平1 mg/kg，采血。

5、應(yīng)用 LC-MS/MS方法測定氨氯地平及其代謝產(chǎn)物不同時間的血藥濃度并計算藥代動力學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果：氨氯地平的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為 Y=1.89305X-0.0321939（r2=0.996789）（0.15~60 ng/mL）；氨氯地平低、中、高三種濃度模擬血漿樣品的提取回收率分別為80.16%、69.98%和66.67%，標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）值分別為17.04%、9.58%和12.91%；低、中、高三個濃度在處理后的血漿基質(zhì)中的峰面積

6、，與等量的低、中、高三個濃度對照品溶液峰面積之比分別為100.35%、100.04%和109.81%，標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）值分別為7.11%、4.27%和14.90%.氨氯地平低、中、高三種濃度血漿樣品的日內(nèi)精密度RSD值分別為13.40%、10.00%和9.80%；日間精密度RSD值分別為13.00%、6.80%和14.20%；準(zhǔn)確度值分別為2.71%、2.69%和2.64%；
　　對照組大鼠體內(nèi)氨氯地平的主要藥動學(xué)參數(shù)如下：AUC

7、0-t，64.40±25.54μg/L·h；AUC0-∞，74.58±29.81μg/L·h；Cmax，5.73±3.16μg/L；Tmax，1.37±0.44 h；t1/2，6.91±1.64 h；Cl，0.02±0.006 L/h/kg；V，222.73±97.80 L/kg；t1/2Ka：0.31±1.88 h。天麻鉤藤組大鼠體內(nèi)主要藥動學(xué)參數(shù)如下：AUC0-t，49.54±29.66μg/L·h；AUC0-∞，48.45±29.

8、66μg/L·h；Cmax，4.28±3.05μg/L；Tmax，1.12±0.35 h；t1/2，5.38±1.16 h；Cl，0.42±0.028 L/h/kg；V，3623.3±1952.07 L/kg；t1/2Ka：0.65±0.72 h。與對照組相比，實驗組藥動學(xué)參數(shù)t1/2明顯縮短，V、Cl和t1/2Ka明顯增大，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　對照組大鼠代謝產(chǎn)物 M1（m/z=363.0869）的主要藥動學(xué)參數(shù)如下：AU

9、C0-t，43.16±11.99μg/L·h；AUC0-∞，45.09±12.48μg/L·h；Cmax，5.55±1.59μg/L；天麻鉤藤組大鼠代謝產(chǎn)物 M1的主要藥動學(xué)參數(shù)如下：AUC0-t，32.56±10.42μg/L·h；AUC0-∞，33.52±11.27μg/L·h；Cmax，5.37±2.00μg/L。與對照組相比，天麻鉤藤組藥動學(xué)參數(shù) AUC0-∞明顯減小，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　對照組大鼠代謝產(chǎn)物 M3（m

10、/z=365.1025）的主要藥動學(xué)參數(shù)如下：AUC0-t，14.85±3.65μg/L·h；AUC0-∞，15.38±3.81μg/L·h；Cmax，1.92±0.54μg/L；天麻鉤藤組大鼠代謝產(chǎn)物 M3的主要藥動學(xué)參數(shù)如下：AUC0-t，10.92±3.68μg/L·h；AUC0-∞，11.27±3.72μg/L·h；Cmax，1.73±0.58μg/L。與對照組相比，天麻鉤藤組大鼠的藥動學(xué)參數(shù)AUC0-t和AUC0-∞明顯減小，

11、差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　對照組大鼠代謝產(chǎn)物 M4（m/z=377.1026）的主要藥動學(xué)參數(shù)如下：AUC0-t，22.23±7.04μg/L·h；AUC0-∞，23.29±7.67μg/L·h；Cmax，2.84±0.91μg/L；天麻鉤藤組大鼠代謝產(chǎn)物 M4的主要藥動學(xué)參數(shù)如下：AUC0-t，16.30±5.39μg/L·h；AUC0-∞，16.55±5.50μg/L·h；Cmax，2.70±1.01μg/L。與對照組相比，天

12、麻鉤藤組大鼠的藥動學(xué)參數(shù)AUC0-∞明顯減小，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　對照組大鼠代謝產(chǎn)物 M6（m/z=406.1290）的主要藥動學(xué)參數(shù)如下：AUC0-t，36.46±17.91μg/L·h；AUC0-∞，84.14±63.44μg/L·h；Cmax，3.27±1.90μg/mL；天麻鉤藤組大鼠代謝產(chǎn)物 M6的主要藥動學(xué)參數(shù)如下：AUC0-t，10.92±3.68μg/L·h；AUC0-∞，11.27±3.72μg/L；Cm

13、ax，1.73±0.58μg/L。與對照組相比，天麻鉤藤組大鼠的藥動學(xué)參數(shù) AUC0-t、AUC0-∞和 Cmax均明顯減小，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：天麻鉤藤飲可抑制氨氯地平的胃腸道吸收，并可能促進(jìn)氨氯地平及其7種主體代謝產(chǎn)物的排泄，由此造成氨氯地平的t1/2縮短和Cl加快。
　　第二部分布比卡因增強(qiáng)大鼠主動脈苯腎上腺素收縮反應(yīng)的機(jī)制研究
　　目的：分析血管內(nèi)皮在布比卡因（BUP）增強(qiáng)苯腎上腺素（Phe）誘發(fā)血

14、管收縮反應(yīng)中的作用。
　　方法：制備大鼠離體胸主動脈血管環(huán)，采用機(jī)械損傷或工具藥干擾血管內(nèi)皮的舒張功能。記錄Phe作為α1受體激動劑誘發(fā)的動脈收縮反應(yīng)。
　　結(jié)果：BUP（30μmol/L）與內(nèi)皮完整血管標(biāo)本孵育20 min后，Phe誘發(fā)的血管收縮 Emax值為2.50±0.05（g），顯著高于對照組標(biāo)本的Emax值。孵育時間縮短至5、10或15 min時，BUP無此增強(qiáng)效應(yīng)。在內(nèi)皮損傷動脈標(biāo)本，同濃度BUP孵育20 min