青蒿琥酯對高糖誘導的腎小管上皮細胞損傷的干預作用及其機制研究.pdf

1、目的：探討青蒿琥酯(Art)是否可以抑制高糖誘導的大鼠腎小管上皮細胞(NRK-52E)凋亡及其相關機制。
　　方法：傳代培養(yǎng)NRK-52E細胞，分為6組:正常對照組、高糖組、Art小劑量組、Art中劑量組、Art高劑量組、依那普利組。培養(yǎng)48 h后，四甲基偶氮唑鹽微量比色(MTT)法觀察細胞增殖能力的改變;流式細胞儀AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡指數(shù);酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測細胞培養(yǎng)上清液中腫瘤壞死因子

2、-α（TNF-α）、白細胞介素-8(IL-8)和單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)蛋白含量;逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)法檢測細胞Toll樣受體4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB) mRNA含量;蛋白質免疫印跡(Western blot)法檢測細胞TLR4、NF-κB蛋白表達水平。
　　結果：①與正常對照組相比，高糖組NRK-52E細胞增殖抑制，細胞凋亡率增高，細胞上清液中TNF-α、IL-8和MCP-1蛋白濃度升高

3、，細胞中TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表達水平明顯升高(P＜0.05)。②與高糖組比較，Art小、中、高劑量組NRK-52E細胞增殖明顯，細胞凋亡率減低，細胞上清液中TNF-α、IL-8和MCP-1蛋白濃度降低，細胞中TLR4、NF-κ BmRNA和蛋白表達水平明顯降低，且干預作用呈劑量依賴性（P＜0.05）。
　　結論：Art可抑制高糖誘導的腎小管上皮細胞凋亡，其機制可能與Art抑制TLR4/NF-κB信號通路，下調TLR