膽綠素對順鉑誘導的腎小管上皮細胞凋亡的保護作用及機制探討.pdf

1、目的：探討膽綠素對順鉑誘導的腎小管上皮細胞凋亡的保護作用及其可能的作用機制。
　　方法：首先利用不同濃度的順鉑(5,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100μmol/L)誘導NRK-52E細胞凋亡，采用流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率，同時采用CCK8檢測細胞存活率。然后將NRK-52E細胞分為正常對照組、順鉑組、膽綠素+順鉑組，正常對照組不作任何處理，順鉑組給予50μmol/L順鉑刺激24h，膽綠素+順鉑組先用30μ

2、mol/L的膽綠素預(yù)處理細胞30min，再給予50μmol/L順鉑刺激24h，比較各組間細胞的凋亡率與存活率，BVR和HO-1的mRNA水平及BVR、HO-1、Total Akt、p-Akt、cleaved caspase3、pro-caspase3、Bax和Bcl-2的蛋白表達水平。
　　結(jié)果：順鉑能誘導NRK-52E細胞凋亡；隨著順鉑濃度的增加，凋亡率逐漸增加，至50μmol/L的順鉑刺激24h時凋亡率達到高峰，之后逐漸下降。

3、而CCK8提示隨著順鉑濃度的增加，細胞存活率逐漸下降。與正常對照組相比，順鉑組凋亡率明顯增加(p<0.01)、細胞存活率下降(p<0.05)；BVR、HO-1的mRNA水平升高(p<0.05)；BVR、HO-1、p-Akt、cleaved caspase3、Bax的蛋白水平明顯較高，Bcl-2蛋白水平明顯較低（p<0.05）。與順鉑組相比，膽綠素+順鉑組凋亡率下降(p<0.05)、細胞存活率增加(p<0.05)；BVR和HO-1的mRN

4、A水平下降(p<0.05)；BVR、HO-1、p-Akt、clea vedca spase3和Bax的蛋白水平明顯降低，Bcl-2蛋白水平明顯升高（p<0.05）。
　　結(jié)論：順鉑能誘導NRK-52E細胞凋亡。膽綠素能減少順鉑誘導的細胞凋亡，其保護作用可能是通過膽綠素-膽紅素氧化還原系統(tǒng)不斷消耗氧自由基，減少順鉑通過氧化應(yīng)激誘導細胞損傷來實現(xiàn)。順鉑誘導BVR酪氨酸磷酸化及HO-1的高表達，可能是細胞受外界損傷時自我保護的一種機制，