長鏈非編碼RNA-MIAT在眼部神經(jīng)和血管功能異常過程的調(diào)控作用研究.pdf

1、目的:
　　血管和神經(jīng)系統(tǒng)雖然在功能上有所不同，但它們通常具有類似的功能維護機制以及相同的調(diào)控因子。神經(jīng)血管功能紊亂已成為一些血管性疾病和神經(jīng)性疾病的發(fā)病機制。本研究旨在闡明長鏈非編碼RNA-MIAT(long non-codingRNA-MIAT)在眼部神經(jīng)血管功能異常進程的調(diào)控作用及其機制。
　　方法:
　　我們首先通過qRT-PCR檢測了MIAT在視網(wǎng)膜血管病變和神經(jīng)病變動物模型以及視網(wǎng)膜血管細胞和神經(jīng)細胞病變中

2、的表達規(guī)律，明確了眼部血管神經(jīng)病變與MIAT表達的相關(guān)性;在體水平，采用視網(wǎng)膜血管發(fā)育、角膜新生血管(CNV)以及糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)等動物模型，通過視網(wǎng)膜平鋪片IB4染色、裂隙燈顯微鏡和免疫熒光染色等技術(shù)，揭示了MIAT干預(yù)對眼部神經(jīng)血管功能異常的調(diào)控作用;離體水平，采用Hoechst染色、JC-1染色和PI/Calcein-AM染色等技術(shù)，揭示了MIAT表達干預(yù)對視網(wǎng)膜細胞活力、增殖、凋亡和細胞相互作用的影響;機制研究方面，采用

3、熒光素酶和qRT-PCR等實驗，揭示了MIAT調(diào)控Müller細胞功能的分子機制。
　　結(jié)果:
　　qRT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，MIAT在氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變(OIR)、視神經(jīng)夾傷(ONT)以及糖尿病的動物模型中表達異常;MIAT在Müller細胞、內(nèi)皮細胞、周細胞以及神經(jīng)元的高氧或者低氧脅迫時表達異常，其中MIAT在Müller細胞脅迫時表達改變最為明顯。在體實驗發(fā)現(xiàn)，MIAT的表達沉默抑制了小鼠視網(wǎng)膜血管的發(fā)育，緩解了角膜堿燒傷

4、小鼠角膜新生血管的形成，減少了糖尿病小鼠視網(wǎng)膜的膠質(zhì)化以及RGC的存活。離體實驗發(fā)現(xiàn)，MIAT的表達沉默降低了Müller細胞和RGC的活性、線粒體膜電位以及增殖能力，促進了凋亡;共培養(yǎng)實驗表明，Müller細胞的MIAT表達改變間接地影響視網(wǎng)膜神經(jīng)元和內(nèi)皮細胞的功能;機制研究發(fā)現(xiàn)，MIAT可通過MIAT/miR-150-5P/VEGF來調(diào)控Müller細胞的功能，從而調(diào)節(jié)眼部神經(jīng)血管間的相互作用。
　　結(jié)論:
　　本研究發(fā)