厄貝沙坦對db-db小鼠心臟炎癥反應和纖維化的影響及其機制的研究.pdf

1、目的：
　　探討血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑厄貝沙坦對2型糖尿病db/db小鼠心臟炎癥反應和纖維化的保護作用及其心臟保護機制。
　　方法：
　　1.動物分組與處理:10周齡db/db小鼠36只，隨機分成模型組，厄貝沙坦治療組50mg/（kg·d）和陽性對照組[小白菊內(nèi)酯(PTL)衍生物治療組25mg/（kg·d）]，每組12只，而同窩出生的10周齡非糖尿病db/+小鼠12只，充當正常對照組。厄貝沙坦治療組和PTL衍生物治療組

2、分別予厄貝沙坦、PTL衍生物溶于生理鹽水中灌服。正常組，模型組小鼠灌服等容積生理鹽水。連續(xù)干預16周。
　　2.一般情況及生化指標檢測:記錄心臟質(zhì)量、體質(zhì)量，測定空腹血糖、血甘油三酯、血總膽固醇含量。
　　3.左室心肌組織HE染色:觀察各組小鼠左室心肌組織病理學變化。
　　4.Masson三色染色:觀察各組心肌組織膠原纖維的含量。
　　5.Western blotting及NF-κB(P65)免疫組化:1）檢測P

3、-IκBα、IκBα的蛋白表達水平和P65的表達及入核激活情況;2）檢測P-JAK2、JAK2、P-STAT3及STAT3的蛋白表達水平。
　　6.qPCR檢測:檢測各組心肌組織促炎細胞因子IL-6、TNF-α以及促纖維化細胞因子TGF-β1mRNA的表達水平。
　　結(jié)果：
　　1.一般情況及生化指標檢測:與正常組相比，模型組、厄貝沙坦治療組、PTL衍生物治療組db/db小鼠均發(fā)生了肥胖、高血糖、高血脂。
　　2

4、.左室心肌組織HE染色:與正常組相比，模型組小鼠心肌組織肌纖維排列紊亂，間質(zhì)增多，并有局灶性炎癥細胞浸潤;厄貝沙坦治療后有所改善，而PTL衍生物的治療改善更明顯。
　　3.Masson三色染色:與正常組比較，模型組心肌組織的細胞間質(zhì)和血管周圍膠原纖維明顯增多，分布不均勻，排列紊亂，并呈網(wǎng)狀連接;厄貝沙坦治療后，膠原纖維數(shù)量有所減少，效果介于兩者之間;而PTL衍生物治療后膠原纖維明顯減少。
　　4.Western blotti

5、ng及NF-κB(P65)免疫組化:1）與正常組比較，模型組心肌組織的P-IκBα蛋白水平升高、IκBα蛋白水平降低，P-IκBα/IκBα升高;NF-κB(P65)活性增強，入核增加;2）與正常組相比，模型組小鼠心肌組織的P-JAK2，P-STAT3蛋白表達明顯上調(diào);以上改變經(jīng)厄貝沙坦治療后有所減輕，而PTL衍生物的治療改善更明顯。四組的JAK2，STAT3蛋白表達均無明顯變化。
　　5.qPCR檢測:與正常組比較，模型組心肌組

6、織的IL-6、TNF-α以及TGF-β1的mRNA的表達水平升高，厄貝沙坦治療后抑制了其表達水平，而PTL衍生物治療后抑制明顯。
　　結(jié)論：
　　1.2型糖尿病db/db小鼠心肌組織NF-κB及JAK2/STAT3信號通路被激活，誘導了IL-6、TNF-α和TGF-β1mRNA的表達，促進心臟炎癥反應和纖維化。
　　2.厄貝沙坦的長期治療降低了IL-6和TNF-αmRNA的表達，改善了2型糖尿病db/db小鼠心臟炎癥反