脂肪干細(xì)胞輔助脂肪移植治療局限性硬皮病的相關(guān)研究.pdf

1、目的:分析脂肪移植治療局限性硬皮病的相關(guān)影響因素，探討脂肪干細(xì)胞(ADSCs)輔助脂肪移植治療局限性硬皮病的可行性。
　　方法:(1)21例脂肪標(biāo)本:局限性硬皮病患者脂肪標(biāo)本6例（未使用藥物治療），局限性硬皮病患者脂肪標(biāo)本5例（曾使用藥物治療），正常脂肪患者脂肪標(biāo)本10例，提取脂肪標(biāo)本中的干細(xì)胞，分離培養(yǎng)，比較脂肪干細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)、增殖能力及成脂能力。(2)激光散斑對(duì)比成像方法測(cè)定8例局限性硬皮病患者病變部位及正常對(duì)側(cè)部位的血流情

2、況。(3)取局限性硬皮病病變部位皮膚標(biāo)本2例及非硬皮病患者皮膚標(biāo)本2例，行成纖維細(xì)胞培養(yǎng)后與脂肪顆粒混勻后移植入裸鼠，觀察脂肪的存活情況。(4)博來霉素硬皮病造模裸鼠18例，正常裸鼠18例，各分為三組:對(duì)照組，脂肪移植組，脂肪干細(xì)胞+脂肪移植組。術(shù)后1月取移植脂肪稱重，取注射部位裸鼠皮膚免疫組化測(cè)定TGF-β1及Ⅲ型膠原含量。
　　結(jié)果:(1)21例患者脂肪干細(xì)胞形態(tài)學(xué)無差異，成脂能力無差異，流式細(xì)胞儀檢測(cè)第3代患者脂肪干細(xì)胞的表

3、面標(biāo)志CD44+都是90％以上，無明顯差異。但局限性硬皮病患者（行激素治療）的干細(xì)胞數(shù)量較正常人及局限性硬皮病患者（未行激素治療）明顯減少，細(xì)胞生長曲線延遲。(2)局限性硬皮病患者病變部位血流灌注為92.69±22.04，正常對(duì)側(cè)部位為95.70±20.43，局限性硬皮病病變部位與對(duì)側(cè)正常部位血流灌注無明顯差異。(3)局限性硬皮病患者成纖維細(xì)胞+脂肪移植后脂肪重量約68.24±19.20mg，正常人成纖維細(xì)胞+脂肪移植后脂肪重量約88.

4、42±20.15mg。(4)正常裸鼠脂肪移植組脂肪重量102.97±17.87mg，脂肪干細(xì)胞+脂肪移植組脂肪重量135.05±27.28mg，硬皮病裸鼠移植脂肪重量77.54±12.40mg，脂肪干細(xì)胞+脂肪移植組脂肪重量102.48±23.16mg。脂肪干細(xì)胞+脂肪移植的存活率均較單純的脂肪移植存活率高。(5)對(duì)于正常裸鼠，TGF-β1含量對(duì)照組為939.34±216.92，脂肪移植組為974.98±470.18，脂肪干細(xì)胞+脂肪移

5、植組為967.66±448.74，Ⅲ型膠原含量對(duì)照組為623.85±113.84，脂肪移植組為605.73±217.17，脂肪干細(xì)胞+脂肪移植為599.34±89.39。對(duì)于硬皮病裸鼠，TGF-β1含量對(duì)照組為1945.95±330.77，脂肪移植組為1418.86±376.82，脂肪干細(xì)胞+脂肪移植為1132.12±190.69，Ⅲ型膠原含量對(duì)照組為2629.39±746.62，脂肪移植組為1531.74±836.41，脂肪干細(xì)胞+脂

6、肪移植為946.92±448.90。正常裸鼠經(jīng)脂肪移植或脂肪干細(xì)胞+脂肪移植后TGF-β1含量及Ⅲ型膠原含量無明顯改變。但對(duì)于硬皮病裸鼠，脂肪移植或者脂肪干細(xì)胞+脂肪移植可降低硬皮病組裸鼠的TGF-β1含量及Ⅲ型膠原含量，尤其是脂肪干細(xì)胞移植后效果更加明顯。
　　結(jié)論:(1)局限性硬皮病患者的脂肪移植不同于正常人群的脂肪移植，長期應(yīng)用激素治療病史及病變部位的微環(huán)境是影響硬皮病患者脂肪移植存活的關(guān)鍵因素，而局限性硬皮病患者的病變部位