不同途徑移植脂肪來(lái)源干細(xì)胞治療大鼠肝硬化模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：比較不同途徑移植脂肪來(lái)源干細(xì)胞(adipose-derived stem cells，ADSCs)治療肝硬化大鼠模型的療效。
　　方法：從健康SD雄性大鼠腹腔脂肪組織提取ADSCs，純化、培養(yǎng)并穩(wěn)定傳至第3代，經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)鑒定后，作為細(xì)胞移植治療肝硬化SD雄性大鼠的種子細(xì)胞。50只SD雄性大鼠，設(shè)正常對(duì)照組（G1，n=10），其余40只采用四氯化碳與橄欖油混合液腹腔注射法建立肝硬化SD雄性大鼠模型，并隨機(jī)分為：肝硬化模型對(duì)照

2、組（G2，n=10）、門靜脈移植組（G3，n=10）、肝動(dòng)脈移植組（G4，n=10）、脾動(dòng)脈移植組（G5，n=10），其中G1又分為G1a(細(xì)胞移植前處死正常對(duì)照組，n=5)、G1b(細(xì)胞移植后處死正常對(duì)照組，n=5)，G2又分為G2a(細(xì)胞移植前處死模型對(duì)照組，n=5)、G2b(細(xì)胞移植后處死模型對(duì)照組，n=5)；造模8周后處死G1a及G2a大鼠，取出肝臟組織做病理檢查，觀察是否造模成功；造模成功后G3、G4及G5分別經(jīng)門靜脈、肝動(dòng)脈

3、及脾動(dòng)脈途徑，注入ADSCs懸液1ml（細(xì)胞數(shù)約1x106）。分別于細(xì)胞移植前、移植后第4周、移植后第8周跟蹤檢測(cè)G1b、G2b、G3、G4及G5大鼠肝功能（包括ALB、TBIL、ALT、AST）；細(xì)胞移植后第8周處死全部大鼠，取出肝臟組織做病理檢查并進(jìn)行肝纖維化組織學(xué)半定量計(jì)分。
　　結(jié)果：從脂肪組織中分離培養(yǎng)的第3代細(xì)胞高表達(dá)ADSCs表面標(biāo)記分子CD29(90.88％)，CD44（96.24%），CD90（95.52%），極

4、低表達(dá)造血細(xì)胞表面分子CD34(0.08%)，CD45(0.34%)；G1a與G2a進(jìn)行肝纖維化程度比較P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；細(xì)胞移植4周后，與G2b比較，G3、G4、G53組大鼠肝功能均得到明顯改善，血清白蛋白顯著升高(P<0.05)，轉(zhuǎn)氨酶、膽紅素顯著降低(P<0.05)，肝纖維化程度顯著減輕(P<0.05)；G3及G4大鼠肝功能改善及肝纖維化減輕程度優(yōu)于G5(P<0.05)，前兩者之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。