槐耳顆粒對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7(ER+)和MDA-MB-231(ER-)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　檢測(cè)槐耳顆粒對(duì)雌激素受體不同表達(dá)狀態(tài)的人乳腺癌細(xì)胞的影響,并研究其可能的作用機(jī)理。
　　方法:
　　體外培養(yǎng)MCF-7（ER+）和MDA-MB-231（ER-）人乳腺癌細(xì)胞，采用不同濃度的槐耳顆粒（1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml）處理該細(xì)胞；運(yùn)用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法觀察其對(duì)MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞增殖的影響；倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)；流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期；膜聯(lián)蛋

2、白V(Annexin V)-異硫氰酸熒光素(FITC)+碘化丙啶(PI)雙參數(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡狀況。
　　結(jié)果:
　?。?）MTT法顯示槐耳顆粒可明顯抑制MCF-7和MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞的生長,隨著藥物濃度和作用時(shí)間的增加，抑制作用逐漸增強(qiáng)，呈時(shí)間-劑量效應(yīng)關(guān)系（P

3、相同時(shí)相時(shí)兩種細(xì)胞的抑制率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　?。?）槐耳顆粒作用MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞48h后，倒置顯微鏡下可見兩種細(xì)胞隨作用濃度增加形態(tài)逐漸改變。空白對(duì)照組細(xì)胞均貼壁良好，MCF-7乳腺癌細(xì)胞形態(tài)呈多邊形，MDA-MB-231細(xì)胞大部分為圓形或梭形，細(xì)胞質(zhì)均勻，細(xì)胞間緊密連接成片；而實(shí)驗(yàn)組隨槐耳顆粒作用濃度的增加，細(xì)胞狀態(tài)趨差，貼壁細(xì)胞逐漸減少，胞質(zhì)內(nèi)顆粒物質(zhì)增多，體積縮小，皺縮變圓，細(xì)胞之間不能連接成片而出現(xiàn)空隙

4、，培養(yǎng)液中可見大量死亡脫壁細(xì)胞。
　?。?）經(jīng)槐耳顆粒處理的MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞周期發(fā)生明顯變化，隨著濃度的增加，細(xì)胞周期中的Gl期細(xì)胞比率逐漸增高，G2和S期細(xì)胞比率下降，與各對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。槐耳顆粒處理72h后，MCF-7細(xì)胞的G1期占細(xì)胞總數(shù)的69.82%；MDA-MB-231細(xì)胞G1期占細(xì)胞總數(shù)的71.79%。
　?。?）Annexin V/PI雙染結(jié)果顯示:與各對(duì)照組相