穩(wěn)定轉(zhuǎn)染ERα基因?qū)DA-MB-231乳腺癌細(xì)胞活性及IL-8，COX-2和VEGF-C的影響.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文穩(wěn)定轉(zhuǎn)染ERα基因?qū)DAMB231乳腺癌細(xì)胞活性及IL8，COX2和VEGFC的影響姓名：張輝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：王深明20090425穩(wěn)定轉(zhuǎn)染ERa基因?qū)DAMB23l乳腺癌細(xì)胞活性及IL8COX一2和VEGFC韻影響增殖、抑制凋亡、促進(jìn)播散潛能、上調(diào)HER02表達(dá)、誘導(dǎo)芳香化酶合成等，從而促進(jìn)惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展。有文獻(xiàn)報(bào)道COX一2的表達(dá)和腫瘤組織的ER狀態(tài)相關(guān)。在MDAMB23l等ER陰性

2、的乳腺癌細(xì)胞中COX2有較高表達(dá)，而在MCF7等ER陽(yáng)性的乳腺癌細(xì)胞中未見(jiàn)其表達(dá)，這可能是ER陰性乳腺癌細(xì)胞惡性程度較高的原因之一。VEGFC是特異性的促淋巴管生成因子，可誘導(dǎo)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖與淋巴管的生成，促進(jìn)胚胎和腫瘤中淋巴管的新生與淋巴網(wǎng)絡(luò)形成。淋巴轉(zhuǎn)移是乳腺癌的主要轉(zhuǎn)移途徑之一，因此VGEFC對(duì)乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移具有重要的意義。VEGFC激活淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞上的VEGFR3，誘導(dǎo)磷脂酰肌醇3激酶信號(hào)通路使p42／p44絲裂原活

3、化蛋白激酶和蛋白激酶B信號(hào)通路激活，發(fā)生級(jí)聯(lián)反應(yīng)，保護(hù)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞免于血清來(lái)源誘導(dǎo)的凋亡，促淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移，促淋巴管生成。病理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，VEGFC的表達(dá)也和ER狀態(tài)相關(guān)，在ER陰性的乳腺癌細(xì)胞中VEGFC呈高表達(dá)，并且其表達(dá)的量和腫瘤的大小，組織分級(jí)，核分級(jí)，血管侵襲以及淋巴結(jié)狀態(tài)高度相關(guān)。本研究選擇ER陰性細(xì)胞株MDAMB23l，擬通過(guò)轉(zhuǎn)染外源性的ER基因進(jìn)入該乳腺癌細(xì)胞中，并建立穩(wěn)定表達(dá)ER的細(xì)胞株，觀察ER對(duì)ER陰性

4、乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移能力的影響。另外，本研究選取三種與ER受體密切相關(guān)并影響乳腺癌細(xì)胞活性的三個(gè)生物學(xué)指標(biāo)(IL8，COX2和VEGFC)進(jìn)行測(cè)定，試圖初步闡述ER影響ER陰性乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)特性的機(jī)制，為進(jìn)一步深入研究打下基礎(chǔ)。方法1細(xì)胞培養(yǎng)乳腺癌細(xì)胞MDA—MB一231和MCF7均在含10％FBS的無(wú)酚紅DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件：5％C02、37。C、95％濕度。兩種細(xì)胞進(jìn)行功能實(shí)驗(yàn)前48小時(shí)換用含lO‘8M17B雌二醇的無(wú)酚