SH-SY5Y細(xì)胞中α7尼古丁受體拮抗或基因沉默對Tau蛋白S404和S214位點磷酸化水平的影響及其與p38 MAPK信號通路的關(guān)系.pdf

1、目的：研究α7尼古丁受體(nAChR）拮抗或基因沉默對SH-SY5Y細(xì)胞Tau蛋白S404和S214位點磷酸化水平的影響及其與p38 MAPK通路的關(guān)系，探討α7 nAChR調(diào)節(jié)Tau蛋白位點磷酸化的相關(guān)機制。
　　方法：用α7 nAChR拮抗劑MLA、p38 MAPK通路阻滯劑SB203580及通路激動劑Anisomycin分別或聯(lián)合處理SH-SY5Y細(xì)胞。用Real-time PCR法和Western blotting法分別測

2、定沉默細(xì)胞中α7 nAChR在mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化；Western blotting方法測定細(xì)胞 Tau蛋白、p-Tau(S404)、p-Tau(S214)、p38 MAPK及 p-p38 MAPK（Thr180/Tyr182）蛋白水平。
　　結(jié)果：α7 nAChR沉默組與空質(zhì)粒組相比，α7 nAChR mRNA和蛋白質(zhì)水平分別降低了91%(P<0.01)和80%(P<0.01)；p-Tau(S404)蛋白水平升高了71

3、%(P<0.01)，p-Tau(S214)蛋白水平升高了73%(P<0.01)，p-p38蛋白水平升高了65%(P<0.01)。此外，Anisomycin與MLA、SB203580與MLA、單獨MLA處理組共同檢測Tau蛋白S404和S214位點磷酸化水平及通路蛋白表達(dá)情況，結(jié)果顯示，MLA處理組和Anisomycin與MLA共同處理組均引起p-Tau(S404)、p-Tau(S214)及p-p38 MAPK蛋白水平明顯升高(P<0.0