TRPC6-ILK在腎小球硬化中作用的研究.pdf

1、目的：
　　腎小球硬化是多種有害因素引起腎小球損傷后出現(xiàn)的共同轉(zhuǎn)歸，是腎功能衰竭的主要病理基礎(chǔ)。其病理是一個漸進的過程，是腎小球內(nèi)實質(zhì)細胞減少，細胞外基質(zhì)（ECM）增多的結(jié)果。足細胞損傷后引起的足細胞數(shù)目減少是腎小球硬化發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵。瞬時受體電位陽離子通道6（TRPC6）在多種腎臟疾病中表達上調(diào)，進一步引起其介導(dǎo)的鈣離子內(nèi)流增加，參與血管緊張素II（Ang II）誘導(dǎo)的足細胞凋亡；表達上調(diào)的TRPC6還會造成足細胞骨架排列紊亂，

2、解聚。另有研究顯示整合素連接激酶（ILK）的表達及活性增高與足細胞骨架重新排列、細胞外基質(zhì)分泌增加、細胞轉(zhuǎn)分化等有關(guān)，而作為激酶的ILK可接受細胞內(nèi)鈣離子的調(diào)節(jié)，影響其表達及活性。因此，在足細胞損傷中，TRPC6可能通過ILK介導(dǎo)一系列改變參與腎小球硬化的發(fā)生發(fā)展。
　　本研究擬證實在各種病理類型腎臟疾病腎穿刺標本中，TRPC6和ILK的表達均明顯增高，且TRPC6的表達與ILK的表達有一定相關(guān)性。本研究還回顧性收集各種病理類型腎

3、臟穿刺標本患者的臨床資料，并比較各種病理類型腎臟疾病患者與對照組患者各項相關(guān)指標，并根據(jù)24h尿蛋白量是否≥3.5g將所有腎臟疾病患者分為腎病綜合征組和非腎病綜合征組，比較分析兩組患者腎臟穿刺標本TRPC6和ILK的染色得分，擬證實TRPC6和ILK的表達與患者尿蛋白存在一定相關(guān)性。
　　方法：
　　為闡明TRPC6和ILK在腎小球硬化發(fā)生發(fā)展中的作用，我們采用以下實驗方法進行研究。
　　1.收集各種病理類型腎臟疾病患

4、者及對照組患者腎臟穿刺標本，采用常規(guī)組織病理以及免疫組織化學(xué)染色后在光學(xué)顯微鏡下觀察TRPC6和ILK在腎小球硬化腎活檢組織中的表達和分布改變，綜合染色強度及陽性細胞數(shù)量進行半定量分析，采用SPSS20.0（Statistical Product and Service Solutions,Version20）統(tǒng)計學(xué)軟件Pearson相關(guān)性分析方法，分析各種病理類型腎臟疾病中TRPC6與ILK表達的相關(guān)性，將P＜0.05定義為差異顯著，

5、有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.回顧性收集各種病理類型腎臟疾病患者及對照組患者臨床血液和尿液生化資料（姓名、性別、年齡、血壓、尿蛋白定性、24h尿蛋白量、血肌酐、血尿素氮、血清白蛋白（ALB）及空腹血糖（GLU）），研究數(shù)據(jù)均來源于第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院病案室紙質(zhì)病歷?；颊咴谛心I臟穿刺活檢術(shù)前需完善相關(guān)檢查、檢驗；除外伴有腫瘤、嚴重感染、血液內(nèi)科疾病（如，多發(fā)性骨髓瘤）和長期激素類藥物治療史的患者。采用SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析各組病理

6、類型腎臟疾病患者臨床資料。
　　3.為確定TRPC6和ILK的表達是否與患者尿蛋白存在一定相關(guān)性；按24h尿蛋白量是否≥3.5g，將各種病理類型腎臟疾病患者分為腎病綜合征組及非腎病綜合征組，分別統(tǒng)計兩組患者TRPC6和ILK的染色得分，并采用SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析兩組患者TRPC6和ILK的表達是否有顯著差異。
　　結(jié)果：
　　在腎小球，TRPC6主要在足細胞表達，其在正常腎組織活檢標本中表達陽性率低于各種病理

7、類型腎臟疾??；ILK主要表達于足細胞與系膜區(qū)，其在各種病理類型腎臟疾病腎組織活檢標本中表達的陽性率高于正常腎組織；在局灶節(jié)段性腎小球硬化癥（FSGS）和糖尿病腎?。―N）腎臟穿刺標本中TRPC6的表達與ILK的表達呈正相關(guān)(r=0.906，P=0.000；r=0.783，P=0.001)；分析各種病理類型腎臟疾病患者與對照組患者血液和尿液生化資料后發(fā)現(xiàn)，除系膜增生性腎小球腎炎（MsPGN）外，其他病理類型腎臟疾病患者尿蛋白定性及24h尿

8、蛋白量較對照組顯著增高，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；按24h尿蛋白量是否≥3.5g，將各種病理類型腎臟疾病患者分為腎病綜合征組及非腎病綜合征組，發(fā)現(xiàn)尿蛋白與TRPC6和ILK的表達相關(guān)，有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　在以蛋白尿為主要表現(xiàn)的各種病理類型腎臟疾病患者腎組織中TRPC6和ILK均高表達；尤其是在FSGS和DN腎臟穿刺標本中，TRPC6的表達與ILK的表達呈正相關(guān)；通過對患者臨床資料及病理資料進行分析后發(fā)現(xiàn)TRP