性激素受體在良性前列腺增生癥中的發(fā)病機制研究.pdf

1、背景：良性前列腺增生癥(benign prostatic hyperplasia，BPH)是一種常見于老年男性的由前列腺移行區(qū)上皮和基質(zhì)良性增生造成膀胱出口梗阻，從而引起患者一系列下尿路癥狀的良性疾病，其發(fā)病率與年齡呈正相關(guān)。目前我國即將進(jìn)入老齡化社會，由BPH帶來的衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)學(xué)壓力更加嚴(yán)峻。目前認(rèn)為BPH是一種由多因素參與的具有復(fù)雜發(fā)病機制的疾病，到目前為止其確切發(fā)病機制及病因仍不清楚。于是明確BPH的確切發(fā)病機制將有可能發(fā)現(xiàn)更加有效的

2、預(yù)防及治療方案，對提高老年男性的生活質(zhì)量、減少社會醫(yī)療保障負(fù)擔(dān)具有重要的意義。
　　目的：本研究針對性激素受體包括雄激素受體(AR)、雌激素受體α(ERα)、雌激素受體β(ERβ)和孕激素受體(PGR)在BPH中的可能機制做一探索性研究，期望能找到一個突破口。鑒于BPH的可能發(fā)病機制的多因素性，在明確上述性激素受體在BPH組織中的確切表達(dá)變化后，擬從可能參與性激素受體mRNA調(diào)控的microRNAs、可能受性激素受體調(diào)控且與細(xì)胞增

3、殖或凋亡相關(guān)的細(xì)胞因子和生長因子、代謝綜合征與性激素受體的相關(guān)性等多方面進(jìn)行探索，在研究過程中根據(jù)實驗發(fā)現(xiàn)結(jié)果及時調(diào)整方案，為進(jìn)一步深入研究并揭示性激素受體在BPH中的確切發(fā)病機制提供一定的思路。
　　方法：
　　1.收集2015年2月～2015年6月在第三軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科住院并行手術(shù)治療且病例資料完整的BPH病例40例，同時收集器官捐獻(xiàn)者以及其他手術(shù)切除前列腺并通過病理診斷明確為正常前列腺的病例5例。
　

4、　2.通過聯(lián)合丙酸睪酮和苯甲酸雌二醇誘導(dǎo)去勢SD雄性大鼠建立大鼠BPH模型。
　　3.聯(lián)合使用IHC、qRT-PCR和WB的方法確定性激素受體包括AR、ERα、ERβ和PGR在BPH組織中較正常前列腺組織的表達(dá)差異，然后采用同樣方法檢測大鼠BPH模型組織中這些受體的表達(dá)差異變化。
　　4.通過芯片檢測初步了解及篩查BPH組織中miRNAs是否存在異常表達(dá)，然后通過qRT-PCR的方法對miRNAs表達(dá)芯片提示可能具有異常表達(dá)

5、的miRNAs的確切表達(dá)進(jìn)行驗證。
　　5.采用qRT-PCR的方法檢測BPH組織中可能受性激素受體調(diào)控且有可能與BPH發(fā)病相關(guān)的細(xì)胞因子、生長因子在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)差異情況。
　　6.根據(jù)MetS的診斷標(biāo)準(zhǔn)對納入研究的 BPH病例進(jìn)行分組，分為BPH伴MetS組和BPH不伴MetS組，并對比分析兩組間臨床資料差異性明確MetS與BPH的相關(guān)性，然后使用qRT-PCR及WB的研究方法明確兩組各性激素受體的表達(dá)差異情況。

6、　　結(jié)果：
　　1.在人BPH組織中AR和PGR表達(dá)顯著升高，ERα的表達(dá)顯著下降；大鼠BPH模型實驗組中PGR的表達(dá)顯著上調(diào)，AR和ERα的表達(dá)顯著下調(diào)；ERβ的表達(dá)未見顯著性差異；IHC、qRT-PCR、WB在檢測上述性激素受體表達(dá)的結(jié)果一致。
　　2.miRNAs芯片檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)miR-126-3p和miR-4672在BPH組織中表達(dá)下調(diào)具有統(tǒng)計學(xué)意義，但是qRT-PCR的驗證結(jié)果未見miR-126-3p、miR-

7、4672、miR-143-3p和miR-145-3p在BPH組織中和正常前列腺組織中的表達(dá)具有顯著性差異。
　　3.采用qRT-PCR方法檢測發(fā)現(xiàn)ETV1、TLR1基因轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)在BPH組織中顯著性上調(diào)，而TGFβ1-SMAD2/3、IL6R-JAK2-STAT3、KRAS-ERK、TLR2基因的轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)在BPH組織和正常前列腺組織中的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4.BPH不伴MetS組與BPH伴MetS組的臨床資料分析

8、：兩組之間年齡相仿；在代謝綜合征相關(guān)各診斷因素上，如BMI、空腹血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白、血壓，兩組間具有顯著性差異(P＜0.05)；在BPH相關(guān)的檢查檢驗結(jié)果方面，國際前列腺癥狀評分以及最大尿流率在兩組間的差異并無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，但總前列腺特異性抗原和前列腺體積在BPH伴MetS組顯著性升高(P＜0.05)；組織炎癥情況對比方面，BPH不伴MetS組內(nèi)的患者前列腺組織炎癥檢出率為46.7％(7/15)，而BPH伴Met

9、S組的患者前列腺組織炎癥檢出率為76.2%(16/21)，但該差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；采用qRT-PCR和WB法的檢測發(fā)現(xiàn)在伴有MetS的BPH患者的前列腺組織中AR、ERα和PGR在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平的表達(dá)均顯著性升高(P＜0.05)，而ERβ的表達(dá)在兩組間未見顯著性差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.證實了BPH組織中AR和PGR的表達(dá)上調(diào)以及ERα的表達(dá)下調(diào)。推測在BPH中AR和PGR具有誘導(dǎo)疾病起病

10、、促進(jìn)疾病進(jìn)展的作用，而ERα則具有抑制作用。激素誘導(dǎo)大鼠BPH模型與人BPH中雄激素/AR通路的活化機制具有差異性。
　　2.就目前該研究的數(shù)據(jù)來看，尚不能認(rèn)為miRNAs與BPH組織中性激素受體的異常表達(dá)具有相關(guān)性，也不能認(rèn)為miRNAs在BPH發(fā)病機制中具有顯著的作用。在篩查BPH組織中miRNAs差異表達(dá)方面需要靈敏度和特異度更高的實驗方法，同時需要擴(kuò)大正常前列腺樣本量繼續(xù)驗證以排除樣本偏倚的影響。
　　3.通過目前

11、所得到的實驗數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)BPH組織中ETV1、TLR1基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)較正常前列腺組織顯著性上調(diào)，而其余所檢測的因子在轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)則無統(tǒng)計學(xué)意義。但是尚不能就此實驗結(jié)果予以下結(jié)論，還需要進(jìn)一步研究明確這些因子蛋白水平及蛋白磷酸化水平的變化。初步推測AR-ETV1通路可能與BPH的發(fā)病具有相關(guān)性，也是我們深入研究的可能方向。
　　4.證實了MetS和BPH的相關(guān)性，伴有MetS的BPH的患者前列腺總體積更大、血清PSA水平更高、組