超聲介導(dǎo)攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡對(duì)大鼠類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分、攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡對(duì)大鼠關(guān)節(jié)的生物相容性觀察及在體超聲輻照參數(shù)篩選
　　目的：探討制備的攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡對(duì)大鼠關(guān)節(jié)組織生物相容性，篩選出超聲關(guān)節(jié)輻照靶向破壞脂質(zhì)微泡合適的超聲參數(shù)，為超聲聯(lián)合攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡治療大鼠類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎提供依據(jù)。
　　方法：取雌性SD大鼠5只，一側(cè)膝關(guān)節(jié)注射生理鹽水，另一側(cè)膝關(guān)節(jié)注射相同劑量攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡，觀察大鼠基本情況，記錄膝關(guān)節(jié)直徑變化，一周后取大鼠膝關(guān)節(jié)行組織切片觀察

2、。取雌性SD大鼠12只，隨機(jī)分為6組，每組2只。膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射制備的攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡，分別以超聲強(qiáng)度（0、2、3.5w/cm2）和輻照時(shí)間（0、300、600s）關(guān)節(jié)腔外輻照，抽取關(guān)節(jié)腔內(nèi)液，光鏡觀察攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡的破碎情況，篩選合適的超聲參數(shù)。
　　結(jié)果：大鼠膝關(guān)節(jié)注射攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡后，關(guān)節(jié)直徑無(wú)變化，組織切片未見(jiàn)滑膜炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。在不同超聲強(qiáng)度和輻照時(shí)間下，攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡有不同程度的破壞，其中300s，2

3、w/cm2組微泡破壞情況較理想。
　　結(jié)論：攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡關(guān)節(jié)腔注射，對(duì)大鼠膝關(guān)節(jié)生物相容性良好，無(wú)致炎作用。超聲強(qiáng)度2w/cm2、輻照時(shí)間為300s，關(guān)節(jié)腔外超聲輻照，可較好靶向破壞攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡。
　　第二部分、超聲介導(dǎo)攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡對(duì)CIA大鼠關(guān)節(jié)炎治療作用及機(jī)制的研究
　　目的：研究超聲介導(dǎo)攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡對(duì)CIA大鼠關(guān)節(jié)炎病變的治療作用及作用機(jī)制，為類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)的靶向治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)

4、。
　　方法：用牛Ⅱ型膠原混合完全弗氏佐劑誘導(dǎo)法建立CIA大鼠模型。取模型大鼠隨機(jī)分為：B、模型對(duì)照組(Model group)；C、紫杉醇組(PTX group)；D、超聲組(US group)；E、攜氧脂質(zhì)微泡組(OLMBs group)；F、攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡組(OPLMBs group)；G、超聲聯(lián)合攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡組(OPLMBs+US group)；H、甲氨蝶呤組(MTX group)，同時(shí)設(shè)正常對(duì)照組（Norm

5、ol group，A）；膝關(guān)節(jié)分別注射生理鹽水或相應(yīng)脂質(zhì)微泡，并關(guān)節(jié)外超聲輻照干預(yù)。觀察大鼠的一般情況，記錄體重和膝關(guān)節(jié)直徑的變化，計(jì)算關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)。末次給藥結(jié)束后隔日對(duì)各組大鼠行X線攝片，取大鼠膝關(guān)節(jié)行組織切片觀察，Western Blot法檢測(cè)滑膜組織中HIF-1α、VEGF的表達(dá)，Elisa法檢測(cè)關(guān)節(jié)液中 IL-6、TNF-α含量，免疫組化法觀察滑膜組織中α-SMA的表達(dá)。
　　結(jié)果：Ⅱ型牛膠原混合完全弗氏佐劑免疫大鼠可成功

6、誘導(dǎo)大鼠類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型。超聲聯(lián)合攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡能明顯改善模型CIA大鼠關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)和病理炎癥評(píng)分、關(guān)節(jié)X線影像學(xué)變化，減少模型大鼠關(guān)節(jié)液中IL-6、TNF-α含量，抑制病變滑膜組織中HIF-1α、VEGF、α-SMA的表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：超聲介導(dǎo)攜氧載紫杉醇脂質(zhì)微泡可明顯抑制CIA大鼠的關(guān)節(jié)炎癥程度，其機(jī)制可能與抑制滑膜細(xì)胞的活化增殖，改善局部乏氧微環(huán)境，減少病變關(guān)節(jié)炎性因子TNF-α、IL-6生成，降低