TDCIPP對大鼠甲狀腺干擾和神經(jīng)毒性效應及其機制研究.pdf

1、研究目的：
　　磷酸三（1,3-二氯-2-丙基）酯（TDCIPP）目前作為一種新型環(huán)境有機污染物得到廣泛關注。環(huán)境監(jiān)測研究發(fā)現(xiàn)，在家中、辦公室和汽車的灰塵等環(huán)境介質(zhì)中，以及尿液、乳液、精液等體液中均檢測到TDCIPP及其代謝物的存在。許多研究已表明TDCIPP能夠干擾魚和雞類物種甲狀腺激素穩(wěn)態(tài)，是一種潛在內(nèi)分泌干擾物，同時又具有神經(jīng)毒性，但很少有相關文獻報道TDCIPP對哺乳動物的毒性效應。本研究著重探討TDCIPP是否對哺乳動物

2、大鼠也具有甲狀腺內(nèi)分泌干擾與神經(jīng)毒性作用，并嘗試闡釋其可能的分子機制。
　　研究方法：
　　1. TDCIPP對大鼠甲狀腺內(nèi)分泌干擾作用研究：青春期雌性SD大鼠分別以每天0，50，100，250 mg/kg/d劑量的TDCIPP從出生后21天(PND21)到PND42連續(xù)經(jīng)口灌胃染毒21天，每天觀察臨床癥狀并記錄體重。收集血清并檢測血清TSH、T3， T4和FT4激素水平變化；組織切片（HE染色）用于檢測甲狀腺形態(tài)學病變。另

3、外，利用RT-PCR和Western blot技術分析甲狀腺和肝臟組織中涉及甲狀腺功能的相關基因和蛋白表達，進一步探究TDCIPP對SD大鼠甲狀腺系統(tǒng)相關分子水平的影響和作用機制。
　　2. TDCIPP對大鼠神經(jīng)毒性作用研究：4周齡雌性SD大鼠分別以0，50，100，250 mg/kg/d劑量TDCIPP連續(xù)經(jīng)口灌胃染毒60天，每天觀察臨床癥狀并記錄體重。Morris水迷宮實驗用于評估大鼠學習與記憶能力；HE染色用于檢查大鼠腦組

4、織病理損傷；為了進一步探討TDCIPP與神經(jīng)毒性之間的內(nèi)在聯(lián)系，我們利用基于1H-NMR的代謝組學技術分析了大鼠腦組織特異神經(jīng)化學物質(zhì)水平變化。
　　研究結果：
　　1. TDCIPP對大鼠甲狀腺內(nèi)分泌干擾作用研究：
　　1.1 TDCIPP暴露能夠引起青春期雌性SD大鼠甲狀腺、肝、腎組織絕對重量、甲狀腺組織相對重量增加。
　　1.2 TDCIPP染毒可以引起大鼠甲狀腺濾泡上皮細胞增生病理變化。
　　1.3

5、 TDCIPP誘導大鼠血清T3水平升高，而不影響T4和FT4變化水平。
　　1.4 TDCIPP暴露可誘導大鼠肝臟組織中CYP3A1和UGT1A6 mRNA與蛋白水平呈劑量依賴性上調(diào)表達，上調(diào)了肝臟1型脫碘酶（DIO1）mRNA的表達，而下調(diào)了TRβmRNA與蛋白的表達水平。
　　1.5 TDCIPP上調(diào)了甲狀腺組織中NIS、Tg和TPO mRNA表達。
　　1.6血清 TSH水平和甲狀腺組織中 TSHr mRNA表達

6、僅在低劑量（50mg/kd/d）TDCIPP組出現(xiàn)有統(tǒng)計學意義下降，但在兩個高劑量組卻出現(xiàn)恢復到對照組水平的趨勢。
　　2. TDCIPP對大鼠神經(jīng)毒性作用研究：
　　2.1 TDCIPP染毒60天不影響大鼠體重獲得。
　　2.2 TDCIPP處理可以導致大鼠的學習與記憶能力顯著下降。
　　2.3 TDCIPP染毒可致大鼠海馬組織 CA1區(qū)椎體神經(jīng)元變性、壞死、甚至缺失；高劑量TDCIPP染毒組大鼠腦組織還可見炎

7、癥細胞侵入、鈣化/骨化灶病理改變。
　　2.4 TDCIPP處理可使大鼠腦組織內(nèi)乳酸、GABA、甘氨酸、脂肪酸、膽固醇等代謝物水平下降，而NAA、谷氨酸、膽堿、?；撬帷⒓〈?、肌酸等代謝物水平升高。
　　2.5大鼠腦組織內(nèi)與 TDCIPP染毒相關的神經(jīng)化合物主要參與體內(nèi)氨基酸與神經(jīng)遞質(zhì)代謝、能量代謝、細胞膜組成、抗氧化等重要的生理生化過程。
　　結論：
　　1. TDCIPP對大鼠甲狀腺內(nèi)分泌干擾作用研究：TDCI

8、PP暴露能夠干擾青春期雌性SD大鼠體內(nèi)肝臟解毒、甲狀腺激素合成、脫碘轉化、代謝、清除等生理功能，引起甲狀腺功能失調(diào)，造成機體甲狀腺激素平衡紊亂，誘發(fā)甲狀腺濾泡增生作為一種代償機制來維持機體甲狀腺激素穩(wěn)態(tài)，保證機體正常生理功能。不同劑量TDCIPP暴露對哺乳動物甲狀腺毒性作用可能涉及不同的分子機制。
　　2. TDCIPP對大鼠神經(jīng)毒性作用研究：實驗劑量的TDCIPP暴露對雌性SD大鼠有一定的神經(jīng)毒性。TDCIPP暴露引起大鼠腦組織