HIV-1感染者PBMCs、CD3+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞PD-1表達對p38 MAPK及NF-κB磷酸化水平的影響.pdf

1、目的：通過研究人類免疫缺陷病毒-1（human immunodeficiency virus-1,HIV-1）感染者外周血單個核細(xì)胞（Peripheral Blood Mononuclear Cells,PBMCs）、CD3+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞程序性死亡因子1（programmed death1,PD-1）表達水平的差異性以及其與核因子κB（Nuclear factor kappa B,NF-κB）、p38分裂原激活的蛋白激酶（p3

2、8 Mitogen Activated Protein Kinase,p38 MAPK）信號通路磷酸化水平的相關(guān)性，探討PD-1表達對PBMCs、CD3+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞活化及效應(yīng)功能的影響。
　　方法：募集HIV-1感染者39例，分為典型艾滋病患者組（Typical AIDS patients,TPs）15例和HIV-1攜帶者組（Carriers,CRs）24例，另取9例健康志愿者（Healthy donors,HDs）血

3、液作為健康對照，已獲得知情同意書。用淋巴細(xì)胞分離液常規(guī)分離獲得PBMCs，細(xì)胞計數(shù)后調(diào)整細(xì)胞濃度至1×107個/ml，分為A、B、C三管，每管100μL細(xì)胞懸浮液。A管為檢測PBMCs、CD3+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞上PD-1的表達：加入適量CD3、CD8、PD-1抗體；B管為檢測PBMCs、CD3+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞PD-1和p38 MAPK的表達：加入刺激劑刺激，經(jīng)固定破膜后，加入適量CD3、CD8、PD-1和p38 MAPK抗

4、體；C管為檢測PBMCs、CD3+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞PD-1和 NF-κB的表達：加入刺激劑刺激，經(jīng)固定破膜后，加入適NF-κB磷酸化水平：TPs組的PBMCs上PD-1的表達頻率顯著高于HDs組與CRs組（P<0.05, P<0.05）；TPs組和HDs組PBMCs中p38 MAPK的表達頻率顯著高于CRs組（P<0.05,P<0.05）；TPs組PBMCs中NF-κB的表達頻率顯著低于HDs組與CRs組（P<0.05,P<0.0

5、5）；HIV-1感染者PBMCs中PD-1、p38 MAPK與CD4計數(shù)存在負(fù)相關(guān)關(guān)系（P<0.05,P<0.05）；NF-κB與CD4計數(shù)存在正相關(guān)關(guān)系（P<0.05）；p38 MAPK與PD-1的表達存在正相關(guān)關(guān)系（P<0.05）；NF-κB與PD-1的表達存在負(fù)相關(guān)關(guān)系（P<0.05）。
　　2.HIV-1感染者CD3+T細(xì)胞上PD-1的表達水平及p38 MAPK、NF-κB磷酸化水平：TPs組PBMCs中CD3+T細(xì)胞PD

6、-1的表達頻率與CRs組、HDs組比較顯著升高（P<0.05, P<0.05）；TPs組和HDs組CD3+T細(xì)胞中p38 MAPK的表達頻率顯著高于CRs組（P<0.05, P<0.05）；TPs組、CRs組和HDs組三組的CD3+T細(xì)胞中NF-κB的表達頻率沒有顯著差異（P＞0.05, P＞0.05,P＞0.05）；相關(guān)性分析表明，HIV-1感染者CD3+T細(xì)胞中PD-1、p38 MAPK與CD4計數(shù)存在負(fù)相關(guān)關(guān)系（P<0.05,P<

7、0.05）；CD3與CD4計數(shù)存在正相關(guān)關(guān)系（P<0.05）；NF-κB與CD4計數(shù)沒有相關(guān)性（P＞0.05）；HIV-1感染者CD3+T細(xì)胞中p38 MAPK與PD-1的表達存在正相關(guān)關(guān)系（P<0.05），NF-κB與PD-1沒有相關(guān)性（P＞0.05）。
　　3. HIV-1感染者CD8+T細(xì)胞上PD-1的表達水平及p38 MAPK、NF-κB磷酸化水平：TPs組PBMCs中CD8的表達頻率顯著高于CRs組和HDs組CD8的表達

8、頻率（P<0.05,P<0.05）；CRs組PBMCs中CD8的表達頻率顯著高于HDs組（P<0.05）；TPs組CD8+T細(xì)胞中PD-1的表達頻率與CRs組、HDs組比較顯著升高（P<0.05,P<0.05）；TPs組CD8+T細(xì)胞中p38 MAPK的表達頻率顯著高于CRs組（P<0.05）；TPs組和CRs組CD8+T細(xì)胞中NF-κB的表達頻率顯著低于HDs組（P<0.05,P<0.05）；TPs組CD8+T細(xì)胞中NF-κB的表達頻

9、率顯著低于CRs組（P<0.05）；HIV-1感染者CD8+T細(xì)胞中CD8、PD-1、p38 MAPK與CD4計數(shù)存在負(fù)相關(guān)關(guān)系（P<0.05,P<0.05,P<0.05）；NF-κB與CD4計數(shù)存在正相關(guān)關(guān)系（P<0.05）；HIV-1感染者CD8+T細(xì)胞中p38 MAPK與PD-1的表達存在正相關(guān)關(guān)系（P<0.05）；NF-κB與PD-1存在負(fù)相關(guān)關(guān)系（P<0.05）。
　　結(jié)論：在慢性HIV-1感染過程中，PD-1可能通過正