慢乙肝患者外周血CD8+T細胞Tim-3表達及意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：通過檢測慢性乙型肝炎( chronic hepatitis B， CHB)患者外周血CD8+T細胞T細胞免疫球蛋白粘蛋白結構域分子-3(T cell immunoglobulin-andmucin-domain-containg molecule-3, Tim-3)的表達，進一步研究Tim-3分子對CHB患者CD8+T細胞增殖能力及HBV特異性CTL功能的影響。
　　 方法：
　　 1、流式細胞技術檢測58例CHB

2、患者和16例健康體檢者外周血單個核細胞( peripheral blood mononuclear cell, PBMC)中CD8+T細胞Tim-3表達水平。
　　 2、羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂(5,6- carboxyfluorescein diacetate,sucanimidyl ester, CFSE)標記9例（58例檢測Tim-3表達CHB患者中9例）患者外周血PBMC,IL-2維持，培養(yǎng)7天；流式細胞技術結合C

3、FSE技術檢測Tim-3mAb阻斷Tim-3/Tim-3配體(Tim-3L)通路前后，CHB患者外周血PBMC中CFSElowCD8+T淋巴細胞比例的改變。
　　 3、流式細胞術檢測CHB患者組織相容性白細胞抗原-A2(histocompatibilityleukocyte antigen-A2, HLA-A2)分型。
　　 4、HBcAg18-27(序列：FLPSDFFPSV)多肽刺激下采用酶聯(lián)免疫斑點(enzyme-

4、 linkedimmunosorbent spot, ELISPOT)技術檢測Tim-3mAb阻斷Tim-3/Tim-3L通路前后，9例(另取檢測Tim-3表達58例中9例CHB患者)HLA-A2陽性患者外周血PBMC中產(chǎn)生干擾素γ（Interferon gamma, IFN-γ）的HBV特異性CTL數(shù)量的改變。
　　 結果：CHB患者外周血PBMC中CD8+T淋巴細胞Tim-3分子表達水平較健康對照顯著升高；Tim-3mAb阻

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