HCC患者中Tim-3-Galectin-9通路對調(diào)節(jié)性T細胞和CD8+T細胞功能的影響.pdf

1、目的：通過健康志愿者和肝細胞性肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)患者中Tim-3+Tregs和Tim-3+CD8+T細胞的頻率、表型和功能分析，探討Tim-3在HCC患者腫瘤局部的功能和臨床意義。
　　方法：分離健康人和HCC患者外周血單個核細胞（PBMCs）及HCC患者肝組織浸潤的單個核細胞，流式檢測Tim-3+Treg細胞和Tim-3+CD8+T細胞頻率、表型及功能特征，免疫組化檢測Foxp3和Ga

2、lectin-9在肝組織內(nèi)的表達。
　　結(jié)果：CD4+Foxp3+Treg細胞在HCC患者腫瘤局部高度聚集且上調(diào)表達共抑制分子Tim-3，Tim-3將CD4+Foxp3highTreg細胞分為兩群，Tim-3+CD4+Foxp3highTregs和Tim-3-CD4+Foxp3highTregs；CD4+Foxp3highTim-3+Treg細胞比CD4+Foxp3highTim-3-Treg細胞表達更高頻率的功能相關(guān)分子（CTL

3、A-4、GITR等）和細胞因子（IL-10、TGF-β），且CD4+Foxp3highTim-3+Treg細胞的頻率與腫瘤患者TNM分期呈正相關(guān)，提示Tim-3的上調(diào)表達加強了腫瘤局部Treg細胞的抑制功能。我們還發(fā)現(xiàn)HCC患者腫瘤局部浸潤CD8+T細胞也顯著上調(diào)表達Tim-3分子，且與Tim-3-CD8+T細胞相比，Tim-3+CD8+T細胞分泌功能細胞因子（IFN-γ,IL-2,TNF-α）和細胞毒相關(guān)分子（GramzymeB，pe

4、rforin）顯著降低，提示Tim-3的上調(diào)表達減弱了腫瘤患者局部CD8+T細胞的抗腫瘤作用。進一步體外實驗研究表明Tim-3的配體Galectin-9在體外可以誘導(dǎo)HCC患者外周血PBMC中Treg和CD8+T細胞上調(diào)表達Tim-3；同時免疫組化技術(shù)顯示HCC患者腫瘤局部高表達Galectin-9，免疫熒光顯示Galectin-9主要由CD68+細胞表達。
　　結(jié)論：HCC患者腫瘤局部聚集了大量抑制功能更加強大的CD4+Foxp