PRPS1突變驅(qū)動ALL對6-MP耐藥及MTX逆轉(zhuǎn)其耐藥性的機制研究.pdf

1、急性淋巴細(xì)胞白血病（Acute Lymphoblastic Leukemia，ALL）是兒童時期最常見的惡性腫瘤，其耐藥往往導(dǎo)致治療失敗和復(fù)發(fā)，明確兒童ALL耐藥機制對于復(fù)發(fā)風(fēng)險的評估具有重大意義。
　　本課題研究發(fā)現(xiàn)在兒童ALL樣本中存在復(fù)發(fā)特異性PRPS1基因突變，該基因編碼的磷酸核糖焦磷酸合成酶（phosphoribosyl pyrophosphate synthetase，PRS）是嘌呤合成中的第一個限速酶，對于嘌呤核苷酸

2、的合成具有重要的調(diào)節(jié)作用，但其基因突變對ALL耐藥復(fù)發(fā)的作用機制尚不明確。本研究主要采用細(xì)胞凋亡實驗，蛋白質(zhì)印跡法和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（liquid chromatography-mass spectrometry，LC-MS）等實驗方法發(fā)現(xiàn)：（1）表達(dá)PRPS1不同突變體的Reh細(xì)胞對巰基類藥物6-巰基嘌呤（6-mercaptopurine，6-MP）耐藥；（2）突變的PRPS1提高了嘌呤從頭合成通路的活性，其中代謝產(chǎn)物次黃嘌呤（hy

3、poxanthine，HX）的異常積累競爭性地抑制了6-MP的代謝，引起ALL細(xì)胞對6-MP耐藥；（3）與甲氨蝶呤（methotrexate，MTX）和6-MP單獨用藥相比，MTX與6-MP的聯(lián)合用藥可以更有效地抑制PRPS1耐藥突變細(xì)胞的增殖，提高細(xì)胞凋亡水平，上調(diào)DNA損傷和凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)；（4）MTX可以逆轉(zhuǎn)PRPS1基因突變引起的ALL細(xì)胞對6-MP的耐藥，其分子機制是抑制嘌呤從頭合成通路的活性，降低細(xì)胞中HX的水平從而促進(jìn)