MicroRNA單核苷酸多態(tài)性與肝細(xì)胞癌易感性及MiR-196a2rs11614913與肝癌預(yù)后相關(guān)性研究.pdf

1、第一部分： MicroRNA單核苷酸多態(tài)性與肝細(xì)胞癌易感性
　　目的：本文擬采用自然人群為基礎(chǔ)病例對(duì)照研究，旨在揭示位于miRNA編碼區(qū)和作用靶點(diǎn)的基因多態(tài)性與肝癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)可能的關(guān)系。綜合分析并揭示環(huán)境因素、遺傳因素與miRNA的交互作用對(duì)肝癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的影響。并根據(jù)肝癌遺傳易感性的分析結(jié)果，探討miRNA不同基因型在易感患者血腫的的表達(dá)特性，為臨床對(duì)于肝癌預(yù)防性診斷提供參考。
　　方法：隨機(jī)選取內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院2013

2、年9月-2016年2月266例肝細(xì)胞癌患者作為實(shí)驗(yàn)組，266例來我院體檢的正常無癌病人為對(duì)照組。統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)組的性別、年齡、高血壓、糖尿病、吸煙、飲酒、病毒感染、腫瘤大小和腫瘤階段。收集兩組患者靜脈血5mL樣品，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)限制性片段多態(tài)性試劑盒，進(jìn)行測(cè)量；通過聚合酶鏈反應(yīng)對(duì)DNA擴(kuò)增。miR-146a2 rs2910164, miR-196a2 rs11614913, miR-149 rs2292832和 miR-499 rs374

3、6444的基因型，通過RT-PCR法進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增后全部測(cè)序。通過病例對(duì)照研究，綜合評(píng)估各個(gè)基因多態(tài)性與肝癌遺傳易感性的關(guān)系，并計(jì)算相應(yīng)的比值比和95％可信區(qū)間。
　　結(jié)果：(1)本研究發(fā)現(xiàn)高血壓、糖尿病、吸煙與患肝癌風(fēng)險(xiǎn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。飲酒和病毒感染與肝癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)。
　　(2)對(duì)位于 miRNA編碼區(qū)的基因多態(tài)性與肝癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系的分析結(jié)果表明，miR-196（TT基因型和T等位基因基因）編碼區(qū)的基因多態(tài)性位點(diǎn)與

4、肝癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著增加，分別增加了2.29倍和1.60倍(95%CI=1.11-2.32)，而miR-146、miR-149和miR-499的多態(tài)性與肝癌危險(xiǎn)性不相關(guān)。
　　(3) HBV感染者miR-196a2（ CT+TT基因型）可能是增加肝細(xì)胞癌的危險(xiǎn)性的原因，性別、年齡和酒精中毒 miR-196的多態(tài)性和肝細(xì)胞癌危險(xiǎn)性之間可能沒有相關(guān)性。
　　結(jié)論：（1）miR-196a2 rs11614913的TT基因型和T等位基

5、因與肝細(xì)胞癌危險(xiǎn)性增加有顯著相關(guān)性，該兩種基因型可能成為肝細(xì)胞癌的診斷的標(biāo)記。
　?。?）HBV感染顯著影響miR-196a2 rs11614913的多態(tài)性與肝細(xì)胞癌危險(xiǎn)性之間的關(guān)系。
　?。?）miR-196a2 rs11614913的TT基因型和T等位基因可能是肝細(xì)胞癌患病危險(xiǎn)性增加的標(biāo)記。
　　（4）miR-196a2 rs11614913的多態(tài)性可能是影響肝細(xì)胞癌的發(fā)展的因素之一，特別是感染HBV的患者。

6、>　　第二部分： MiR-196a2rs11614913多態(tài)性與肝癌預(yù)后關(guān)系的研究
　　目的：由實(shí)驗(yàn)一可以發(fā)現(xiàn)MiR-196a的多態(tài)性與肝癌的發(fā)病可能相關(guān)，本部分的研究就MiR-196a基因多態(tài)性與原發(fā)性肝癌預(yù)后相關(guān)指標(biāo)之間的相關(guān)性進(jìn)行分析，旨在為指導(dǎo)肝細(xì)胞癌化療藥物的治療和評(píng)估患者的預(yù)后及生存時(shí)間提供可能的參考。
　　方法：隨機(jī)選取2013年9月-2016年2月123例肝細(xì)胞癌內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院肝細(xì)胞癌患者作為實(shí)驗(yàn)組。

7、研究對(duì)象采用 RT-PCR方法檢測(cè)其MiR-196a2rs11614913基因多態(tài)性；采用基因計(jì)數(shù)方法檢驗(yàn)對(duì)象等位基因頻率和基因型頻率。藥物治療組：肝癌術(shù)后手術(shù)后1個(gè)月選用 FOLFOX（奧沙利鉑＋亞葉酸鈣＋氟尿嘧啶）聯(lián)合治療,全部患者均愿意在手術(shù)后接受化療，術(shù)前后基線資料均從臨床病例中獲得，病人出院后每隔四周電話隨訪或者門診隨訪，直到患者死亡或本次研究結(jié)束。對(duì)比基線資料，觀察MiR-196a2rs11614913基因多態(tài)性類型，對(duì)比M

8、iR-196a2rs11614913基因多態(tài)性檢測(cè)情況。
　　結(jié)果：選取123例肝癌患者中，90例(73.2%)腫瘤直徑小于5cm，33例(26.8%)腫瘤直徑大于5cm，47例(38.2%)顯示為腫瘤TNM分期中的II期，76例(61.8%)顯示為III-IV期。MiR-196a基因型在化療藥物敏感組和不敏感組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=11.91, P=0.001)。與MiR-196a功能基因型相比較，MiR-196a缺陷基因型

9、患者生存時(shí)間較長(zhǎng)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MiR-196a基因缺陷型顯著降低了肝癌的病死風(fēng)險(xiǎn)，HR(95%CI)為0.49(0.25-0.96)。
　　結(jié)論：（1）MiR-196a2rs11614913的多態(tài)性與患者對(duì)化療藥物敏感性和生存時(shí)間相關(guān)。而與MiR-196a2rs11614913功能型相比較，MiR-196a2rs11614913的缺陷型基因型的肝癌患者對(duì)化療藥物更敏感。
　　（2） MiR-196a2rs116149