氯化錳長期低劑量染毒對大鼠子代生精細胞的影響及其作用機理.pdf

1、目的：通過親代雌性 SD大鼠長期低劑量錳染毒，觀察其對子代雄性大鼠生精細胞的影響。
　　方法：雌性SD大鼠（體重90-120 g）32只隨機分為對照組、2 mg/kg、4 mg/kg及8 mg/kg染錳組，8只/組。分別腹腔注射等容氯化錳（MnCl·4H2O）和生理鹽水（NS），5d/w，1次/d，共8w。后與正常雄性SD大鼠交配，通過陰道栓檢測確定孕期后持續(xù)染毒6w（妊娠期和哺乳期各3w）。取子代成熟期（8w齡）雄性SD大鼠睪丸

2、和血清做以下檢測：1.蘇木精-伊紅（HE）染色觀察睪丸結構；2.Real-time PCR技術檢測雄性子鼠睪丸凋亡相關基因OPA1、DRP1、Caspase9、Bim、FOXO3A的mRNA表達情況；3.免疫組化法和Western blot檢測上述凋亡相關蛋白定位和定量表達情況；4.化學發(fā)光法檢測子代大鼠血清總睪酮含量；5.WST-1法檢測子代大鼠血清 SOD活力；6.可見光法檢測子代大鼠血清CAT活力；7.酶促反應法檢測子代大鼠血清G

3、SH-Px活力。
　　結果：1.對照組睪丸曲細精管管腔大小基本一致、各級生精細胞有序排列，間質正常無充血、出血及炎癥細胞浸潤；各染錳組睪丸組織結構呈現(xiàn)不同程度的形態(tài)學改變，且其程度隨染錳劑量增加而逐漸加重。
　　2.錳對大鼠子代睪丸生精細胞DRP1、Caspase9、Bim、FOXO3A表達的影響：與對照組相比，各染錳組DRP1、Caspase9、Bim、FOXO3A mRNA、免疫組化染色陽性細胞率和蛋白相對表達量均較正常

4、組偏高（P<0.05），且各染錳組相比，隨染錳劑量的增加而增強（P<0.05）。
　　3.錳對大鼠子代睪丸生精細胞 OPA1的表達影響：與對照組相比，各染錳組 OPA1 mRNA、免疫組化染色陽性細胞率和蛋白相對表達量均較正常組偏低（P<0.05），且各染錳組相比，隨染錳劑量的增加而減弱（P<0.05）。
　　4.錳對子代雄性大鼠血清總睪酮含量的影響：各染錳組較對照組相比均升高（P<0.05）,且各染錳組之間相比，隨染錳劑量

5、的增加而降低（P<0.05）。
　　5.錳對子代雄性大鼠血清抗氧化酶系統(tǒng)的影響：與對照組相比，各染錳組SOD、CAT和GSH-Px活力均降低（P<0.05），且各染錳組之間相比，隨染錳劑量的增加而降低（P<0.05）。
　　結論：長期低劑量染錳可通過胎盤屏障和血睪屏障進入子代大鼠睪丸，引起生精細胞凋亡，導致其生精障礙?？赡艿臋C制為：
　　1.作用于下丘腦-垂體-性腺軸，降低子代大鼠血清睪酮水平，引起精子發(fā)育的細胞周期阻