氯化錳對PC12細胞的毒性及其部分機理研究.pdf

1、目的：以多巴胺能神經(jīng)元PC12細胞作為靶細胞，觀察其染氯化錳后的生長增殖及凋亡情況、原癌基因MDM2蛋白與促凋亡基因P53蛋白的表達情況，以及黃芪對其拮抗作用，探討氯化錳致PC12細胞凋亡作用及其分子機理，為闡述氯化錳的神經(jīng)毒性部分機制研究及防治工作提供理論依據(jù)。 方法：體外培養(yǎng)多巴胺能神經(jīng)細胞PC12細胞，通過MTT比色試驗觀察染氯化錳后PC12細胞的增殖情況，確定毒作用劑量；運用流式細胞術(FCM)及原位缺口末端標記法(T

2、unel)觀察PC12細胞的凋亡情況及黃芪的拮抗作用；采用免疫細胞化學法檢測PC12細胞P53、MDM2蛋白表達情況。 結(jié)果：氯化錳對PC12細胞的生長有明顯的抑制作用，并呈時間．劑量效應關系；流式細胞術(FCM)及原位缺口末端標記法(Tunel)檢測結(jié)果一致顯示氯化錳能誘導PCI2細胞凋亡，并呈濃度依賴性，各染毒組與對照組比較差異有顯著性(P<0．01)；而加入黃芪后，各組凋亡率明顯降低，差異有顯著性(P<0．05)；P53

3、蛋白的表達隨氯化錳濃度的增高而增高，呈濃度依賴性，與凋亡率呈正相關關系(R=0．9296，P<0．05)，MDM2蛋白的表達隨氯化錳濃度的增高而降低，亦呈濃度依賴性，與凋亡率呈負相關關系(R=-0.8965，P<0.05)。 結(jié)論： (1)在一定條件下氯化錳能明顯抑制PC12細胞生長與增殖； (2)氯化錳可以通過促進PC12細胞的P53蛋白的表達、抑制MDM2蛋白表達誘導其發(fā)生凋亡，并呈濃度依賴性；