基于UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)的蜜炙黃芪大鼠體內(nèi)代謝成分分析.pdf

1、黃芪是傳統(tǒng)補(bǔ)氣藥，臨床上常使用生品和蜜炙品。生品黃芪主要用于益衛(wèi)固表，利水消腫，托毒生肌，蜜炙可加強(qiáng)補(bǔ)中益氣的作用。目前，人們對(duì)蜜炙黃芪和黃芪的研究多在體外一種或幾種成分的含量變化上，其臨床療效差異的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)并沒(méi)有被闡述；口服藥物入血成分才可能成為起效物質(zhì)，而藥物起效也可能是代謝物作用結(jié)果，研究藥物在體內(nèi)的吸收代謝更有利于尋找其藥效物質(zhì)。本課題通過(guò)研究黃芪蜜炙前后在大鼠體內(nèi)的代謝譜及差異，為探尋其臨床療效差異的物質(zhì)基礎(chǔ)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

2、
　　首先采用菲羅門kinetex柱對(duì)蜜炙黃芪和黃芪水提物體外成分進(jìn)行表征，共鑒定了包含16個(gè)黃酮類和15個(gè)皂苷類化合物在內(nèi)共39個(gè)成分，方法學(xué)考察結(jié)果表明方法可靠穩(wěn)定，可用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。然后利用UPLC/Q-TOF-MS結(jié)合多元統(tǒng)計(jì)分析方法(OPLS-DA)對(duì)大鼠口服蜜炙黃芪和黃芪水提液后的血清和尿液進(jìn)行成分分析，共找出66個(gè)藥物代謝物和9個(gè)藥物原型；代謝物分析結(jié)果表明藥物在大鼠體內(nèi)主要發(fā)生去糖基化、甲基化、去甲基化、羥基

3、化、去羥基化、葡萄糖醛酸化、硫酸化和水解反應(yīng)；9個(gè)體內(nèi)移行成分包括毛蕊異黃酮苷(calycosin-7-O-β-D-glucoside)、芒柄花苷(ononin)、毛蕊異黃酮(calycosin)、芒柄花素(formononetin)、黃芪甲苷(astragaloside IV)、黃芪皂苷II(astragaloside II)、3-羥基-9,10-二甲氧基紫檀烷（(6aR,11aR)-3-Hydro-xy-9,10-dimethoxy

4、pterocarpan）、7,2’-二羥基-3’,4’-二甲氧基異黃烷苷(7,2’-Dihydroxy-3’,4’-dimethoxyisoflavan-7-O-β-D-glucoside)和7,2’-二羥基-3’,4’-二甲氧基異黃烷(7,2’-Dihydroxy-3’,4’-dimethoxyisoflavan)。應(yīng)用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法(OP LS-DA)分析方法對(duì)給藥黃芪蜜炙前后水提物1h后大鼠的血清和24h內(nèi)

5、的尿液分別進(jìn)行對(duì)比分析，分別找出了17和20個(gè)差異代謝物。此外，本課題還利用UPLC/Q-TOF-MS技術(shù)測(cè)定了血清中主要成分的含量，測(cè)定結(jié)果表明毛蕊異黃酮苷和芒柄花苷的吸收炙品組明顯高于生品組，從而說(shuō)明半定量結(jié)果是可靠的。
　　以上結(jié)果表明，大鼠口服蜜炙黃芪和黃芪水提物后，在體內(nèi)的吸收代謝存在明顯差異，其中藥物原型毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮、芒柄花苷和芒柄花素是吸收代謝差異大的成分，推測(cè)其與黃芪蜜炙前后臨床療效的差異相關(guān)；本課題對(duì)