TGF-β-CTGF軸在肝臟祖細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化中的作用和機(jī)制研究.pdf

1、肝細(xì)胞癌世界上排名第六的最常見(jiàn)癌癥，由于預(yù)后不良而成為癌癥死因中排名第三位的惡性腫瘤。由于缺乏可行的有效治療措施，對(duì)高危病人的預(yù)防已經(jīng)被作為一個(gè)可選的策略。肝癌可以發(fā)源于腫瘤起始細(xì)胞即腫瘤干細(xì)胞。肝癌的的主要風(fēng)險(xiǎn)因子是肝硬化，而且一系列的證據(jù)表明轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子在肝硬化和肝癌的進(jìn)展中發(fā)揮重要作用，并且 T GF-β在肝臟祖細(xì)胞惡化成為腫瘤起始細(xì)胞中也發(fā)揮至關(guān)重要的作用。本文中，我們發(fā)現(xiàn)在二乙基亞硝胺誘導(dǎo)的大鼠肝癌模型中肝臟

2、祖細(xì)胞的激活大量增加，并且肝臟祖細(xì)胞中CTGF的表達(dá)也有明顯升高。但是當(dāng)我們同時(shí)給予DEN和CTGF合成抑制劑Iloprost后發(fā)現(xiàn)肝臟祖細(xì)胞的激活減少，其中CTGF的表達(dá)也同步降低。更重要的是，肝癌的發(fā)生率也出現(xiàn)明顯的下降。此外，DEN注射引起 TGF-β和腫瘤起始細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá)增加，并且兩者之間呈正相關(guān)性。而給予CTGF合成抑制劑同樣可以降低TGF-β1和腫瘤起始細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá)。這也進(jìn)一步預(yù)示CTGF和TGF-β可能參與腫瘤起始

3、細(xì)胞的產(chǎn)生進(jìn)而在肝癌的發(fā)生中發(fā)揮作用。為了模擬大鼠體內(nèi)的長(zhǎng)期的TGF-β存在的環(huán)境，我們?cè)隗w外用長(zhǎng)期（18周）低劑量TGF-β1（0.25 ng/ml）處理大鼠肝臟祖細(xì)胞系W B-F344而建立WB-F344-TβLT細(xì)胞系。我們發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期低劑量TGF-β處理可以損害肝臟祖細(xì)胞的分化能力而促進(jìn)肝臟祖細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化，這與之前的一些研究結(jié)果具有一致性。進(jìn)而，我們準(zhǔn)備探討CTGF在這種長(zhǎng)期的低劑量TGF-β1誘導(dǎo)的肝臟祖細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化中的作用。

4、所以，我們利用慢病毒構(gòu)建了敲減CTGF的大鼠肝臟祖細(xì)胞并研究了其在肝臟祖細(xì)胞中的生物學(xué)功能，結(jié)果顯示敲減CTGF后可以在一定程度上恢復(fù)肝臟祖細(xì)胞的分化能力，并且肝臟祖細(xì)胞的惡性程度明顯降低。我們前期的研究結(jié)果證實(shí)TGF-β1可以在肝臟祖細(xì)胞中誘導(dǎo)C TGF的表達(dá)。本文中，我們進(jìn)一步探討CTGF對(duì)TGF-β信號(hào)通路的影響，以及通過(guò)什么機(jī)制發(fā)揮作用。我們發(fā)現(xiàn)CTGF可以通過(guò)促進(jìn) TGF-β1-Smad3通路的激活，抑制TGF-β1-Smad

5、1/5通路的激活水平介導(dǎo)促進(jìn)肝臟祖細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化的作用。綜上所述，我們證實(shí)了大鼠肝癌發(fā)生過(guò)程中有肝臟祖細(xì)胞的參與，CTGF合成抑制劑可以起到保護(hù)肝臟，減少肝癌發(fā)生的作用。在TGF-β1所誘導(dǎo)的肝臟祖細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化過(guò)程中，CTGF在其中也發(fā)揮促進(jìn)作用。另外，我們初步證明了TGF-β-C TGF的惡性循環(huán)可以增加肝癌的發(fā)生，促進(jìn)肝臟祖細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化，并且通過(guò)調(diào)控肝臟祖細(xì)胞中不同TGF-β/S mad通路的激活水平來(lái)發(fā)揮作用。我們的研究首次確