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文檔簡介
1、目的:食管鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生及發(fā)展是否有腫瘤擴(kuò)增基因STAT3、Nanog的參與尚不清楚。本研究主要對STAT3、Nanog基因在食管癌組織中的表達(dá)及其關(guān)聯(lián)性進(jìn)行研究討論,希望為食管癌的基因治療尋找到新的靶點(diǎn)。并討論食管癌臨床病理特點(diǎn)與它們之間存在什么樣的相互關(guān)系。
方法:收集2014年河南科技大學(xué)第四附屬醫(yī)院食管癌切除標(biāo)本50例,選取年齡42~79(61.15±15)歲。選取10例睪丸精原細(xì)胞瘤標(biāo)本作為免疫組化的陽性對照。食管
2、癌組織中,高分化鱗癌14例,中分化鱗癌17例,低分化鱗癌19例。根據(jù)TNM分期標(biāo)準(zhǔn)判斷,腫瘤浸潤深度:T116例、T212例、T314例、T48例;伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移21例;伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移24例。對它們的癌組織及相應(yīng)癌旁組織進(jìn)行研究。癌旁組織為食管癌手術(shù)切除標(biāo)本中距癌組織邊緣3~5cm的食管組織。STAT3、Nanog在mRNA和蛋白水平上的表達(dá)分別采用實(shí)時熒光定量RT-PCR和Western blot的方法進(jìn)行檢測。對食管癌組織和癌旁組織中
3、基因的表達(dá),蛋白水平上還可以采用免疫組織化學(xué)法進(jìn)行檢測。應(yīng)用SPASS22.0統(tǒng)計(jì)軟件,分析STAT3、Nanog的表達(dá)與食管癌患者的臨床病理類型之間的關(guān)系。
結(jié)果:
1.免疫組化的結(jié)果食管癌組織中STAT3、Nanog主要表達(dá)于細(xì)胞核中。STAT3在食管癌及癌旁組織中的陽性率分別達(dá)到了72%及30%。Nanog在食管癌組織及癌旁組織中陽性率分別為54%及18%。它們在食管癌組織中的表達(dá)量顯著高于癌旁組織,差異有統(tǒng)計(jì)
4、學(xué)意義(P<0.05)。STAT3與Nanog表達(dá)與食管癌臨床病理特征的關(guān)系從結(jié)果中也有所反映。STAT3與Nanog在低分化食管癌組中的表達(dá)明顯高于中高分化癌組(P<0.05);伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織中基因表達(dá)陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05);無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的食管癌組織中基因陽性率明顯低于伴遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的食管癌組織(P<0.05);食管癌組織中STAT3與Nanog的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.303,P<0.05)。
2.Wes
5、tern blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果凝膠成像系統(tǒng)顯示目的蛋白STAT3、Nanog大小分別約為88kDa、35kDa,以蛋白大小為48kDa的tublin作為內(nèi)參。應(yīng)用灰度分析軟件(ImageJ軟件)對目的蛋白(STAT3、Nanog)條帶進(jìn)行灰度分析,用與tublin灰度值的比值表示。Western blottin結(jié)果顯示目的蛋白在食管癌組織中表達(dá)量較高,在癌旁組織中低表達(dá),這一結(jié)果與免疫組化所得出的結(jié)果相一致。
3.RT-PCR檢測
6、結(jié)果在癌組織中STAT3與Nanog擴(kuò)增量大于癌旁組織中的擴(kuò)增量,說明STAT3與Nanog在食管癌組織比癌旁組織中表達(dá)量高。Nanog在50例食管癌組織及相應(yīng)癌旁組織中,食管癌組織明顯高于相應(yīng)癌旁組織的有27例,相應(yīng)癌旁組織明顯高于食管癌組織的有23例。STAT3癌組織高于相應(yīng)癌旁組織有37例,相應(yīng)癌旁組織明顯高于食管癌組織的有13例。
結(jié)論:
1.STAT3、Nanog與食管癌的發(fā)生、發(fā)展可能有一定的關(guān)系。
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