肥胖對(duì)鼻內(nèi)滴注大腸桿菌致小鼠肺臟炎癥的影響研究.pdf

1、通過(guò)向高脂飼料誘導(dǎo)的肥胖小鼠鼻內(nèi)滴注不同數(shù)量大腸桿菌，旨在探討肥胖對(duì)機(jī)體免疫調(diào)控及局部組織防御狀態(tài)的影響，為后期開(kāi)展肥胖對(duì)機(jī)體免疫功能的研究提供一定的理論依據(jù)。
　　(1)將30只24-25日齡的昆明雄鼠隨機(jī)分為:10只飼喂常規(guī)飼料作為正常組(ND組)，20只飼喂高脂飼料作為高脂組（HD組），連續(xù)飼喂8周后，檢測(cè)小鼠血清中抵抗素、葡萄糖、胰島素濃度、肺泡灌洗液(BALF)中白細(xì)胞數(shù)量和肺組織形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果顯示，8周后，HD組小鼠

2、體重、附睪脂肪量、血糖、血清胰島素、RETN濃度、Lee's指數(shù)、BALF中WBC、GRA、LYM、MID數(shù)量均顯著高于ND組，支氣管和肺泡周?chē)仔约?xì)胞浸潤(rùn)較ND組明顯增加。
　　(2)取肥胖與非肥胖小鼠各32只，肥胖小鼠分為:A（6只）、B（20只）、C（6只）組，非肥胖小鼠分為:D（6只）、E（20只）、F（6只）組。A、D組鼻內(nèi)滴注40μL濃度為1×108 CFU/μL大腸桿菌菌液，B、E組鼻內(nèi)滴注40μL1×109 CFU

3、/μL大腸桿菌菌液，C、F組鼻內(nèi)滴注40μL生理鹽水。24h后，每組取6只小鼠，采集肺臟，進(jìn)行大腸桿菌計(jì)數(shù)、觀察病理形態(tài)。結(jié)果顯示，大腸桿菌滴鼻后，A、B、D、E組小鼠出現(xiàn)了典型的呼吸道感染癥狀，其中A、D組無(wú)死亡，B、E組死亡率分別為25％和10％;肺臟中大腸桿菌數(shù)量比較，A組顯著高于D組，B、E組無(wú)顯著性差異;各試驗(yàn)組小鼠肺臟均出現(xiàn)了不同程度的充血出血、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等病理變化，且A組損傷大于D組，B組大于E組。
　　(3)將1

4、80只肥胖小鼠分為:0h（6只）、Ⅰ（42只）、Ⅲ（90只）、Ⅴ（42只）組，150只非肥胖小鼠分為:0h（6只）、Ⅱ（42只）、Ⅳ（60只）、Ⅵ（42只）組。0h不做任何處理，Ⅰ、Ⅱ組鼻內(nèi)滴注40μL1×108 CFU/μL的大腸桿菌菌液，Ⅲ、Ⅳ組鼻內(nèi)滴注40μL1×109 CFU/μL的大腸桿菌菌液，Ⅴ、Ⅵ組鼻內(nèi)滴注40μL生理鹽水。于0h和感染后2、6、12、24、48、72、96h，各組隨機(jī)選取6只小鼠，采集檢測(cè)血液和BALF中

5、白細(xì)胞數(shù)量，血清和肺組織中的細(xì)胞因子濃度，觀察肺臟組織病理學(xué)變化。大腸桿菌滴鼻后，結(jié)果顯示:①Ⅰ、Ⅱ組血液中WBC先升高，后降低，在24h降至最低，隨后逐漸升高;Ⅲ、Ⅳ組WBC在2h時(shí)降低，后逐漸升高再降低，至48h時(shí)降至最低后稍有回升;②各組小鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-10、RETN迅速升高并維持至48h后逐漸降低;24h內(nèi)的細(xì)胞因子，Ⅰ組顯著高于Ⅱ組、Ⅲ組顯著高于Ⅳ組;96h時(shí)，Ⅰ組IL-10和RETN顯著低于Ⅱ組，Ⅲ組I

6、L-6、IL-10顯著高于Ⅳ組。③各組小鼠BALF中WBC、GRA、LYM、MID迅速增加，至24h達(dá)到峰值后急劇下降;整個(gè)試驗(yàn)期間，Ⅰ組白細(xì)胞數(shù)量高于Ⅱ組，Ⅲ組高于Ⅳ組。④各組小鼠肺臟中的RETN、TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、MIP-2、IL-12和MCP-1先略降低，后在24h或48h升至峰值后下降;肺臟中檢測(cè)的細(xì)胞因子比較，整個(gè)試驗(yàn)期間，Ⅲ組高于Ⅳ組;72h內(nèi)，Ⅰ組高于Ⅱ組;至96h，Ⅰ組TNF-α、IL-10、I

7、L-12顯著低于Ⅱ組，而MIP-2和IL-6顯著高于Ⅱ組。⑤各組小鼠的肺臟出現(xiàn)了不同程度的充血出血、炎性浸潤(rùn)等病理變化，隨后炎癥消散，組織結(jié)構(gòu)清晰。6h和24h時(shí)，Ⅰ組較Ⅱ組、Ⅲ組較Ⅳ組，肺臟中炎性細(xì)胞浸潤(rùn)更多，組織損傷更明顯;96h時(shí)，Ⅱ組較Ⅰ組、Ⅲ組較Ⅳ組，組織結(jié)構(gòu)更紊亂。
　　結(jié)論:1.昆明小鼠通過(guò)連續(xù)飼喂高脂飼料8周，可成功建立肥胖模型。2.鼻內(nèi)滴注40μL1×108 CFU/μL的大腸桿菌，成功建立了小鼠非致死性肺部感染