HDAC9在冠習(xí)病發(fā)生發(fā)展中的作用研究.pdf

1、冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。–oronary artery heart disease，C H D)其死亡率居于我國疾病死亡構(gòu)成比的首位。動脈粥樣硬化（Aheerosclerosis，A S)是其病理基礎(chǔ)，抑制動脈粥樣硬化的形成是防治CHD的關(guān)鍵。單核巨噬細胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)加速AS的形成和發(fā)展。近年來，研究發(fā)現(xiàn)在動脈粥樣硬化發(fā)展的過程中組蛋白去乙酰化酶9(Histone deacetylase9，HDAC9)調(diào)節(jié)氧化低密度脂蛋白膽固醇（O

2、xidized-low density lipoprotein cholesteryl，ox-LDL-C)誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞損傷和炎癥，是大血管粥樣斑塊形成的重要危險因素。
　　然而HDAC9促進血管粥樣斑塊形成的機制尚不清楚，本研究擬通過比較ST段抬高型心肌梗死（ST segment elevation myocardial infarction，STEMI)患者和不穩(wěn)定型心絞痛（Unstable angina，U A)患者與非冠心

3、?。∟one coronary heart disease，N C H D)患者外周血單個核細胞（Peripheral blood mononuclear cell， PBMC) HDAC9表達水平的差異，同時研究HDAC9在人急性單核白血病細胞(Human acute monocytic leukemia cell，THP-1)與冠狀動脈內(nèi)皮細胞粘附的作用，從而揭示HDAC9在冠心病發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　目的:
　　探討

4、STEMI患者、U A患者以及NCHD患者的PBMC中HDAC9的表達差異以及HDAC9在冠心病發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法:
　　收集2015年5月至2016年1月在我院心內(nèi)科因“胸痛”入院，行冠狀動脈造影檢查的患者共155例，根據(jù)其冠狀動脈造影以及檢驗結(jié)果分為C H D組，98例（STEMI組45例，U A組53例）及NCHD組57例。收集并分析患者的一般資料、口服葡萄糖耐量試驗結(jié)果（Oral glucose toler

5、ance test, OGTT)、糖化血紅蛋白（Glycosylated hemoglobin A1C，H b A1 C)、低密度脂蛋白膽固醇（Low density lipoprotein cholesteryl, LDL-C)、總甘油三酉旨（Total glycerin，TG)、總膽固醇（Total cholesterol)、高密度脂蛋白膽固醇（High density lipoprotein cholestery, HDL-C)、

6、肌f丐蛋白I(Cardiac troponin I, cTnI)、B型腦鈉肽（B-type natriuretic peptide, B N P)、左尤、室身寸血分數(shù)（Left ventricular ejection fraction, L V E F),肌酸激酶M B同工酶（Creatine kinase-MB)等，以及分離外周血單個核細胞提取蛋白采用Western Blot方法檢測HDAC9的表達水平。
　　應(yīng)用 ox-LD

7、L誘導(dǎo) THP-1細胞，RNA干擾（RNA interference, RNAi)技術(shù)將THP-1細胞HDAC9基因沉默，以及siRAN陰性對照試劑（siRNA negative control, s i R N A N C)處理THP-1細胞。采用經(jīng)典GPO Trinder酶學(xué)法分別測定各處理組細胞的結(jié)合膽固醇含量，并使用虎紅染色方法測定不同組THP-1細胞與人冠狀動脈內(nèi)皮細胞的粘附率。
　　結(jié)果:
　　1、與NCHD組比

8、較，STEMI組和U A組的HDAC9的表達量明顯增高（P<0.01)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；與U A組比較STEMI組的HDAC9表達量明顯增高（P<0.01)差異有統(tǒng)計學(xué)意義。與服用他汀類藥物患者比較，未服用他汀類藥物患者的HDAC9表達量無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　2、與 siRNA-NC組比較，HDAC9-siRNA組結(jié)合膽固醇含量明顯降低（P<0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；與對照組（Control，C trl)相比，ox-LDL組結(jié)

9、合膽固醇含量明顯增高（P<0.01)差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3、與 siRNA-NC組比較HDAC9-siRNA組 THP-1細胞與人冠狀動脈內(nèi)皮細胞(Human coronary artery endothelial cells，H C A E C)的粘附率明顯降低（P<0.01)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；與siRNA-NC組比較，siRAN-NC+ox-LDL組THP-1細胞與HCAEC粘附率明顯增高（P<0.01)，差異有統(tǒng)計學(xué)意