黃肝顆粒劑提取工藝及質(zhì)量控制研究.pdf

1、目的：
　　本研究對在臨床上應(yīng)用40余年的黃肝煎劑進(jìn)行顆粒劑轉(zhuǎn)化研究，對處方中飲片進(jìn)行質(zhì)量控制、提取工藝及制劑工藝優(yōu)化、建立顆粒劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、考察顆粒劑穩(wěn)定性及對肝臟的保護(hù)作用。為黃肝顆粒劑的研制開發(fā)提供可靠的實驗數(shù)據(jù)，為進(jìn)一步的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1.根據(jù)2010年版藥典，對處方中飲片鑒別、檢查、含量測定，以控制飲片的質(zhì)量。采用單因素結(jié)合正交試驗設(shè)計，以黃芩苷及龍膽苦苷提取率作為評價指標(biāo)，對料液比、提取

2、時間、提取次數(shù)三個因素進(jìn)行優(yōu)化，以確定最佳提取工藝。
　　2.將輔料與浸膏粉配伍篩選制粒條件，以成型性、吸濕性、流動性為評價指標(biāo)，綜合評價顆粒。
　　3.在制劑的質(zhì)量研究中，建立黃芩、黃柏、龍膽薄層鑒別方法，HPLC法測定黃芩苷、龍膽苦苷含量，進(jìn)行方法學(xué)考察并建立黃肝顆粒劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案。
　　4.顆粒劑的穩(wěn)定性研究中，將顆粒放置在室溫條件下6個月考察其變化。
　　5.以CCl4致小鼠急性肝損傷為模型，考察顆粒對肝

3、臟的保護(hù)作用。
　　結(jié)果與討論：
　　1.處方中飲片性狀、鑒別、檢查、含量測定均符合2010年版藥典。通過正交試驗篩選出對提取率的影響為：提取時間＞料液比＞提取次數(shù)，其中提取時間對提取率有顯著的影響（p<0.05）。料液比為1:10、提取時間為90min、提取次數(shù)為2次為最優(yōu)提取條件。驗證實驗表明此方法穩(wěn)定、重復(fù)性好切實可行。
　　2.篩選制劑的處方為甘露醇：乳糖：滑石粉：干膏粉（6:3:1:10）加入75％乙醇制粒，

4、測得其粒度、水分、溶化性、裝量差異等均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。
　　3.采用TLC法鑒別黃芩、黃柏、龍膽，供試品溶液色譜與對照品溶液色譜相對應(yīng)位置上顯相同顏色斑點，且陰性對照溶液無此斑點，建立了TLC鑒別方法。HPLC法測定黃芩苷、龍膽苦苷小試顆粒平均含量為8.37%、1.76%，方法學(xué)考察中精密度、穩(wěn)定性及重復(fù)性RSD小于2.0%，且溶液在48h內(nèi)穩(wěn)定，龍膽苦苷、黃芩苷回收率均在98%-102%之間，在此色譜條件下峰型、分離度較好，建立了

5、黃肝顆粒劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案。
　　4.在制劑穩(wěn)定性的考察中，6個月內(nèi)的樣品初步穩(wěn)定性良好。
　　5.黃肝顆粒（高、中劑量組）對CCl4致小鼠急性肝損傷均有保護(hù)作用，測定給藥組高、中劑量組血清中ALT、AST含量；肝勻漿中MDA、SOD、GSH、GSH-Px與模型組比較均有顯著差異（P＜0.01）；觀察其病理切片可明顯看出給藥組肝組織形態(tài)結(jié)構(gòu)接近正常水平。
　　結(jié)論：
　　處方中的飲片均符合2010年版藥典規(guī)定，顆粒