血清炎癥因子IL-32、HS-CRP、PCT與COPD表型的相關分析.pdf

1、目的:慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是呼吸系統(tǒng)常見病和多發(fā)病，在全世界范圍內(nèi)發(fā)病率和死亡率呈不斷升高趨勢，診療任務艱巨。以發(fā)病機制為主的疾病異質(zhì)性研究和表型識別在個體化診療中有重要意義。炎癥過程是目前公認的主要致病機制，不論在局部還是全身炎癥過程中，炎癥因子均參與并發(fā)揮重要作用。白細胞介素-32(interleukin-32)是新發(fā)現(xiàn)的促炎細胞因子，參與了COPD

2、發(fā)生發(fā)展，其高表達與COPD關系密切;超敏C反應蛋白(hypersensitive C-reactiveprotein，Hs-CRP)、降鈣素原(procalcitonin，PCT)是目前臨床常用的反應全身炎癥狀況的生物標志物，多用于評估病情及指導治療。本實驗以COPD患者為研究對象，分別進行病程時期（急性加重期、緩解期）、評估分級(A、B、C、D組)及CT分型（氣管炎型、肺氣腫型、混合型）的分組，通過IL-32、Hs-CRP和PCT表

3、達水平的檢測和相關性分析，為疾病異質(zhì)性研究和個體化治療提供新思路。
　　方法:
　　1、研究對象
　　2014.1-2015.1河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院門診就診的COPD患者和同期門診體檢證實的健康對照者。入選標準:COPD患者的診斷符合2013年中華醫(yī)學會呼吸分會慢性阻塞性肺疾病學組修訂的《慢性阻塞性肺疾病診治指南》，其中男性50例，女性20例，平均年齡65.11±9.54歲;健康對照組男性5例，女性7例，平均年齡69.

4、00±3.19歲。受試者年齡、性別差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05）。排除標準:①肺炎;②合并其他部位細菌感染;③合并支氣管哮喘、支氣管擴張、嚴重氣胸、肺結(jié)核活動期，合并嚴重心腦血管、腎臟及血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病者;④外院接受抗感染治療超過5天。患者就診時行肺HRCT檢查和Hs-CRP測定，留取血液樣本，病情允許者行肺功能檢查;未行肺功能檢查者病情好轉(zhuǎn)后完善肺功能檢查。依據(jù)Anthonisen提出的COPD急性加重期和緩解期標準將研究對象

5、分為①COPD急性加重期，男性29例，女性13例，平均年齡67.36±9.62歲;②COPD緩解期，男性21例，女性7例，平均年齡61.75±8.50歲。并依據(jù)中華醫(yī)學會呼吸分會2013年制定的《慢性阻塞性肺疾病診治指南》綜合評估標準將COPD患者分為①A組:低風險，癥狀少;男性11例，女性4例，平均年齡63.53±6.44歲;②B組:低風險，癥狀多;男性9例，女性5例，平均年齡65.14±8.89歲;③C組:高風險，癥狀少;男性10例

6、，女性4例，平均年齡56.64±7.92歲;④D組:高風險，癥狀多;男性20例，女性7例，平均年齡70.37±8.92歲。同時根據(jù)HRCT將患者分為①肺氣腫型;男性20例，女性2例，平均年齡64.91±9.31歲;②氣管炎型;男性14例，女性12例，平均年齡65.85±11.94歲;③混合型:男性16例，女性6例，平均年齡64.45±7.69歲。
　　2014.1-2015.1河北省人民醫(yī)院胸外科行手術(shù)治療的肺癌患者，男性16例，

7、女性2例，平均年齡60.09±12.71歲，均行肺CT、肺功能、血氣分析及血常規(guī)檢查。將患者分為①健康吸煙組:肺功能正常，有吸煙史，男性6例，女性0例，平均年齡52.67±9.50歲;②健康非吸煙組:肺功能正常，無吸煙史，男性4例，女性2例，平均年齡69.25±8.96歲;③COPD吸煙組:符合COPD診斷標準，F(xiàn)EV1％FVC＜70％，男性6例，女性0例，平均年齡56.50±14.6歲。
　　2、標本采集
　　門診就診的C

8、OPD患者及同期健康體檢者就診時空腹采肘靜脈血4ml，注入干燥的真空非抗凝管中，以普通離心機4000r/min離心5分鐘，吸取上清液置于EP管中，標記，-70℃冰箱凍存，待ELISA法檢測IL-32、PCT表達水平。
　　門診就診患者采肘靜脈血2ml，注入EDTA抗凝管中，即刻免疫層析法檢測全血Hs-CRP表達水平。
　　患者手術(shù)中，取手術(shù)切取肺組織標本癌旁2cm外肺組織，分組并做好標記，將肺組織勻漿后取上清液，同時留取患者

9、血清，方法同上，于-70℃凍存，待ELISA法檢測IL-32表達水平。
　　3、血清、肺組織IL-32，血清PCT和全血Hs-CRP表達水平的測定
　　ELISA法分別測定血清和肺組織上清液中IL-32和血清PCT濃度。免疫層析法檢測全血Hs-CRP表達水平。
　　最小的IL-32檢測濃度小于15pg/ml。
　　Hs-CRP正常參考值為＜5mg/L，＞5mg/L為異常;PCT正常參考值為＜0.05ng/ml，＞

10、0.05ng/ml為異常，0.05-0.5ng/ml為局部感染，0.5-2ng/ml嚴重細菌感染或膿毒癥發(fā)生率增高。
　　結(jié)果:
　　1、COPD患者血清和肺組織上清液IL-32表達水平高于健康對照組（包括健康吸煙組和健康非吸煙組）(P＜0.05）;健康吸煙組肺組織上清液和血清中IL-32表達水平高于健康非吸煙組(P＜0.05); COPD患者和健康吸煙組肺組織上清液中IL-32表達水平高于血清(P＜0.05）。
　　

11、2、COPD患者急性加重期與緩解期血清IL-32表達水平高于健康對照組(P＜0.05); COPD急性加重期血清IL-32表達水平高于緩解期（P＜0.05）。
　　3、A、B、C、D組血清IL-32表達水平高于健康對照組（P＜0.05）;D組血清IL-32表達水平高于A、B和C組(P＜0.05);余差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　4、肺氣腫型和混合型IL-32表達水平高于氣管炎型(P＜0.05);肺氣腫型和混合型之間

12、差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05）。
　　5、COPD患者急性加重期血清Hs-CRP、PCT表達水平均高于緩解期和健康對照組(P＜0.05); COPD緩解期與健康對照組間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　6、A、B、C、D組Hs-CRP表達水平高于健康對照組(P＜0.05），D組Hs-CRP表達水平高于A組、B組和C組(P＜0.05），余組間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05）;D組PCT表達水平高于B組和健康對照組(P＜

13、0.05），余組間差異無統(tǒng)計學差異(P＞0.05）。
　　7、混合型、氣管炎型和肺氣腫型Hs-CRP表達水平高于健康對照組，混合型Hs-CRP表達水平高于氣管炎型和肺氣腫型，氣管炎Hs-CRP表達水平高于肺氣腫型(P＜0.05）;氣管炎型、混合型PCT表達水平高于肺氣腫型和健康對照組(P＜0.05），氣管炎型和混合型間PCT表達水平差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），肺氣腫型和健康對照組間PCT表達水平差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05

14、）。
　　8、COPD患者血清IL-32表達水平與FEV1％pre存在負相關(r=-0.414，P＜0.05);COPD患者血清IL-32表達水平與RV％TLC存在正相關(r=0.311，P＜0.05); COPD患者血清IL-32與Hs-CRP、PCT無相關性（P＞0.05); COPD患者血清Hs-CRP、PCT與氣流受限無相關性(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　IL-32參與了COPD的發(fā)生發(fā)展，與氣流受限和肺