2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  體外貼壁培養(yǎng)獲得純度較高的骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(OPBMSCs),為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)打好可靠基礎(chǔ),探討不同濃度骨形態(tài)發(fā)生蛋白2( BMP2)在體外對骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(OPBMSCs)成脂分化中的影響,并為臨床指導(dǎo)骨質(zhì)疏松治療方案提供理論依據(jù)。
  方法:
  抽取骨質(zhì)疏松患者的骨髓,在體外用貼壁培養(yǎng)法獲得原代OP BMSCs,流式細(xì)胞儀檢測P2細(xì)胞表面抗原標(biāo)志物;取第二、三代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn):1個

2、對照組+5個實(shí)驗(yàn)組:實(shí)驗(yàn)組分兩個階段進(jìn)行操作:第一階段用成脂誘導(dǎo)液誘導(dǎo)3天,第二階段在成脂誘導(dǎo)液中添加不同濃度的BMP-2(ng/ml)0.5、5、50、100、500分別繼續(xù)誘導(dǎo)14天;而對照組始終用常規(guī) BMSCs培養(yǎng)基培養(yǎng)。各組經(jīng)誘導(dǎo)后第17天油紅O染色,觀察細(xì)胞脂滴染色情況及檢測細(xì)胞成脂OD值。同時WB檢測PPAR-γ、C/EBPa蛋白質(zhì)表達(dá)情況以及Q-PCR檢測PPAR-γ、C/EBPa基因表達(dá)水平。
  結(jié)果:

3、  貼壁培養(yǎng)法分離、傳代獲得第二代干細(xì)胞,流式結(jié)果P2表達(dá)CD44、HLA-ABC、CD105均>92%,而陰性抗原CD34、CD45表達(dá)均<7%,可以說明OPBMSCs純度高。各實(shí)驗(yàn)組經(jīng)誘導(dǎo)17天后,油紅O染色圖片觀察示:BMP-2濃度(ng/ml)在0.5到50的濃度下脂滴數(shù)呈現(xiàn)增多趨勢;而在50到500的濃度下脂滴數(shù)呈下降趨勢,濃度500與0這兩組脂滴數(shù)量相近。脂肪定量OD值統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:對照組與任何實(shí)驗(yàn)組脂肪含量對比,P<0.05

4、,可以認(rèn)為對照組的脂肪含量比任何實(shí)驗(yàn)組都要低;實(shí)驗(yàn)組BMP2濃度(ng/ml)在5與50對比,P<0.05,說明在此區(qū)間脂肪含量呈上升趨勢,具有BMP2濃度依賴性;而BMP-2濃度100與500對比,P<0.05,說明在此區(qū)間脂肪含量呈下降趨勢。成脂肪相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子PPARγ、C/EBP及蛋白表達(dá)水平也證明呈現(xiàn)與脂肪定量OD值相類似趨勢。
  結(jié)論:
  貼壁培養(yǎng)可以獲得高純度OPBMSCs,為實(shí)驗(yàn)提供可靠基礎(chǔ)。低濃度BMP2

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