缺血缺氧致小鼠海馬炎癥損傷與DNA甲基化改變的研究.pdf

1、海馬是哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的重要組成部分，對學(xué)習(xí)、記憶等生理過程起到至關(guān)重要的作用，但對缺血缺氧最為敏感，損傷也最嚴(yán)重。缺血缺氧性腦損傷（hypoxic-isc hemic brain damage, HIBD）因其發(fā)病率高、致死率高、致殘率高，所以治療困難，造成的后果嚴(yán)重，使患者生活質(zhì)量受到極大影響，也給家庭及社會造成了巨大的危害。因此，本研究通過建立體外缺血缺氧模型，探討HIBD對小鼠海馬造成的損傷、損傷機制及DNA甲基化水平的改變

2、。
　　目的：①探討缺血缺氧性腦損傷對小鼠海馬的炎癥損傷作用；②探討缺血缺氧性腦損傷對小鼠海馬DNA甲基化水平改變的影響。
　　方法：①利用C57BL/6J野生健康成年小鼠建立體外缺血缺氧性腦損傷模型，分為正常對照組（正常培養(yǎng)基培養(yǎng)海馬腦片）、缺血缺氧實驗組（利用無糖培養(yǎng)基培養(yǎng)海馬腦片模擬缺血，用缺氧罐充入95％ N2、5% CO2培養(yǎng)模擬缺氧）。模型建立后用2,3,5-triphenyl tetrazolium chlor

3、ide（TTC）法檢測建模是否成功。經(jīng)TTC染色后正常對照組顯示紅色，缺血缺氧實驗組顯示蒼白色，說明模型建立成功。②將對照組和實驗組海馬腦片，用免疫組織化學(xué)熒光染色法檢測c-fos、COX2、5-mc、DNMT3a、MBD2的表達情況，Western blotting蛋白半定量檢測NF-κB、c-fos、COX2、DNMT1、DNMT3a、MBD2的表達，以對海馬炎癥損傷及DNA甲基化水平變化進行研究。
　　結(jié)果：①缺血缺氧性腦損

4、傷對小鼠海馬炎癥損傷的影響：在免疫組織化學(xué)染色實驗中，缺血缺氧實驗組海馬腦片炎癥損傷細胞明顯多于對照組（P<0.01）；Western blotting蛋白半定量檢測結(jié)果和免疫組織化學(xué)染色法結(jié)果相一致；②缺血缺氧性腦損傷對小鼠海馬DNA甲基化水平的影響：免疫組織化學(xué)染色顯示，缺血缺氧實驗組海馬腦片DNA甲基化相關(guān)酶的陽性細胞表達數(shù)明顯多于對照組（P<0.01），實驗組DNA甲基化水平高于對照組，Western blotting蛋白半定量