不同成熟狀態(tài)下樹(shù)突狀細(xì)胞與TRAF6間的關(guān)系.pdf

1、目的：類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis, RA）是一種常見(jiàn)的慢性、損傷性自身免疫性疾病，其發(fā)病機(jī)制被認(rèn)為是由于體內(nèi)免疫平衡打破，體液免疫亢進(jìn)。樹(shù)突狀細(xì)胞（Dendritic Cell, DC）是體內(nèi)抗原提呈能力最強(qiáng)也是唯一能激活初始T細(xì)胞誘發(fā)正向免疫應(yīng)答的細(xì)胞，成熟DC被認(rèn)為在RA的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用。腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（tumor necrosis factorreceptor-associated

2、factor6, TRAF6）是DC發(fā)育、生長(zhǎng)、成熟的關(guān)鍵分子，研究TRAF6與DC成熟程度之間的關(guān)系，為將來(lái)治療RA提供新的藥物靶點(diǎn)及方向。
　　方法：細(xì)胞因子rmGM-CSF、rmIL-4誘導(dǎo)C57小鼠骨髓細(xì)胞定向分化為未成熟DC，然后用細(xì)胞因子rmGM-CSF、rmIL-4、TNF-?、LPS、FK506分成四組分別誘導(dǎo)DC分化為不同成熟狀態(tài)，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-II分子證明DC處于不同成熟程

3、度；ELISA檢測(cè) DC不同成熟狀態(tài)下 IL-12的表達(dá)情況；逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）、蛋白免疫印跡法（Western-blot）檢測(cè)各組 DC中 TRAF6的mRNA以及蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：細(xì)胞因子rmGM-CSF、rmIL-4成功誘導(dǎo)骨髓細(xì)胞定向分化為DC，四組中表面分子CD80、CD86、MHC-II的表達(dá)量都有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P?0.05）,其中以 CD86表現(xiàn)得最為明顯；四組中IL-12的分泌量隨著

4、DC的分化程度越高，分泌量也逐漸增加，組間存在明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)而差異（P?0.05），D組中IL-12分泌量達(dá)到10620.73?276.73 pg/ml；D組中mRNA-TRAF6的表達(dá)水平顯著高于其它三組（P<0.01）；B、C兩組之間mRNA-TRAF6的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但都高于對(duì)照組（A組）（P<0.01）；D組中 TRAF6的蛋白表達(dá)量最高，與其它三組有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01），B、C組與A組比較也存在明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（