APE1在擬老化大鼠模型蝸神經(jīng)核中的表達(dá)研究.pdf

1、目的：初步探討轉(zhuǎn)錄因子脫嘌呤/脫嘧啶核酸內(nèi)切酶1（apurinic/apyrimidinic Endonuclease1）APE1和NF-E2相關(guān)因子2（nuclear factor erythroid2）Nrf-2在D-半乳糖誘導(dǎo)的擬老化大鼠模型蝸核中的表達(dá)功能。
　　方法：選取2月齡聽(tīng)功能正常的雄性健康Sprague-Dawley（SD）大鼠162只，隨機(jī)分為兩組，D-半乳糖擬老化組和對(duì)照組。D-半乳糖擬老化組：每日頸背部皮下

2、注射D-半乳糖（500mg/Kg）一次，連續(xù)8周；NS對(duì)照組：每日頸背部皮下注射0.9％生理鹽水（10ml/Kg）一次，連續(xù)8周。造模完成后，擬老化組和對(duì)照組再分為三個(gè)亞組：4月齡組（造模結(jié)束后0個(gè)月）、10月齡組（造模結(jié)束后6個(gè)月）6個(gè)月、16月齡組（造模結(jié)束后12個(gè)月），動(dòng)物處死前聽(tīng)性腦干反應(yīng)（ABR）檢測(cè)大鼠聽(tīng)閾，處死時(shí)留取各組大鼠的蝸神經(jīng)核組織。TUNEL染色檢測(cè)蝸核細(xì)胞凋亡水平；尼氏染色檢測(cè)蝸核神經(jīng)元密度；通過(guò)Western

3、blot和免疫組化染色檢測(cè)APE、Nrf-2在蝸核中的蛋白表達(dá)含量。
　　結(jié)果：①ABR聽(tīng)性腦干測(cè)聽(tīng)的聽(tīng)力結(jié)果顯示：相同月齡、相同頻率（4kHz、8kHz、16kHz、24kHz、32kHz）擬老化組和對(duì)照組比較，閾值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。②TUNEL染色結(jié)果顯示：4月齡時(shí)，擬老化組和對(duì)照組凋亡水平無(wú)明顯差異；10月齡和16月齡時(shí)，擬老化組和對(duì)照組相比，凋亡增加（p<0.05）。③尼氏染色結(jié)果顯示：4月齡和10月齡時(shí)，

4、擬老化組蝸核神經(jīng)元細(xì)胞的密度與對(duì)照組相比無(wú)顯著變化，而16月齡時(shí)，擬老化組神經(jīng)元密度降低（p<0.05）。④Western blot結(jié)果顯示：各時(shí)間點(diǎn)Nrf-2蛋白在擬老化組的表達(dá)較對(duì)照組顯著降低（p<0.01）；4月齡時(shí)APE1蛋白在擬老化組和對(duì)照組的表達(dá)差別沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，10月齡和16月齡時(shí)APE1蛋白在擬老化組的表達(dá)較實(shí)驗(yàn)組下降（p<0.01）。⑤免疫組化結(jié)果顯示：Nrf-2蛋白在各時(shí)間點(diǎn)擬老化組的表達(dá)均較對(duì)照組降低；APE1蛋