健脾化瘀方對胃癌SGC7901-DDP細(xì)胞的影響及相關(guān)機制研究.pdf

1、目的:探討健脾化瘀方對人胃癌耐藥株SGC7901/DDP的影響及其可能逆轉(zhuǎn)耐藥的相關(guān)機制，進(jìn)一步探索中藥聯(lián)合化療藥抗腫瘤的作用，為腫瘤的綜合治療提供新的思路。
　　方法:
　　1.MTT法鑒定耐藥株SGC7901/DDP的耐藥性;
　　2.MTT法測定健脾化瘀方對SGC7901/DDP的增殖抑制作用;
　　3.流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測健脾化瘀方單藥及聯(lián)合DDP對細(xì)胞的凋亡作用;
　　4.RT-qPCR檢測健

2、脾化瘀方作用前后相關(guān)基因Bcl-2、Bax、PTEN mRNA的表達(dá)變化，推斷健脾化瘀方逆轉(zhuǎn)耐藥的可能機制;
　　5.Western Blot分析不同濃度健脾化瘀方對Akt、P-Akt、PI3K、NF-κB p65等蛋白表達(dá)的影響，推測健脾化瘀方逆轉(zhuǎn)耐藥的可能途徑。
　　結(jié)果:
　　1.耐藥株SGC7901/DDP比親代細(xì)胞株SGC7901對順鉑的敏感性明顯降低，說明具有耐藥性。
　　2.健脾化瘀方對SGC790

3、1/DDP細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用，這種作用呈現(xiàn)時間、濃度依賴性。
　　3.健脾化瘀方呈現(xiàn)濃度依賴性地促進(jìn)細(xì)胞凋亡，并能增加順鉑對耐藥株的毒性作用。
　　4.RT-qPCR檢測不同濃度健脾化瘀方應(yīng)用前后Bcl-2的表達(dá)下調(diào)，Bax、PTEN的表達(dá)上調(diào)。
　　5.Western Blot證實健脾化瘀方對Akt，PI3K，NF-κB p65有抑制作用;對P-Akt無明顯抑制作用。隨著健脾化瘀方濃度增加Akt，PI3K，NF