CD44v6、Vimentin與紫杉醇、多柔比星治療后三陰性乳腺癌細胞系化療敏感性變化的關(guān)系研究.pdf

1、背景：乳腺癌是女性惡性腫瘤中發(fā)生率最高、死亡率最高的癌癥之一。三陰性乳腺癌（TNBC）是乳腺癌中的一個臨床預后很差、高異質(zhì)性的特殊亞型。細胞毒性化療是目前唯一有效的治療選擇。然而，盡管最初的化療具有很高的敏感性，TNBC患者出現(xiàn)藥物敏感性降低，進而發(fā)生復發(fā)及轉(zhuǎn)移仍然是TNBC最終治療失敗的主要原因。因此，了解其具體的耐藥機制，降低化療的耐藥率是我們急需解決的問題。
　　目的：本研究以三陰性乳腺癌細胞系MDA-MB-231為研究對象

2、，比較PTX、ADM單獨處理乳腺癌細胞后，腫瘤細胞干性、EMT標志物以及乳腺癌細胞對化療敏感性的變化。分析細胞出現(xiàn)化療藥物敏感性降低的原因和可能機制，并尋找有價值的分子治療靶點。
　　方法：采用CCK-8法檢測乳腺癌細胞對紫杉醇（PTX）、多柔比星（ADM）藥物的敏感性，計算IC50值；采用Western blotting檢測化療藥物處理細胞后CD44v6和Vimentin的蛋白表達情況。采用球體形成實驗比較藥物處理后細胞球體形成

3、能力的差異，并使用顯微鏡觀察球體形態(tài)學上的差異。所有的數(shù)據(jù)均使用GraphPad Prism6.0進行統(tǒng)計學處理。
　　結(jié)果：采用不同濃度梯度的PTX和ADM作用細胞后，MDA-MB-231細胞出現(xiàn)不同程度的生長抑制，呈劑量依賴性表現(xiàn)，細胞對不同的藥物也產(chǎn)生了不同的反應。此外，相應藥物濃度對初次處理后存活下來的細胞的生長抑制作用均較初次減弱，其IC50值相應增高。用Western blotting的方法檢測PTX和ADM單藥處理細

4、胞后CD44v6與Vimentin蛋白的表達，結(jié)果提示化療藥物作用乳腺癌細胞后引起CD44v6與Vimentin蛋白的表達均顯著升高。球體形成實驗中PTX組、ADM組比對照組的成球能力明顯增強，然而PTX組與ADM組并無明顯差異。球體形態(tài)上，與PTX組、ADM組相比，對照組形成的球體普遍較小，細胞連接更為疏松。
　　結(jié)論：
　　1．PTX、ADM藥物處理三陰性乳腺癌細胞系后可引起其腫瘤干細胞及EMT標記蛋白的表達增高，隨之腫