TIMP-1通過抑制Cyclin B1降低乳腺癌細(xì)胞MCF-7對紫杉醇敏感性的研究.pdf

1、南京醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文TIMP1通過抑制CyclinB1降低乳腺癌細(xì)胞MCF7對紫杉醇敏感性的研究姓名：王婷申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：孫玉潔20080510南京醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文摘要紫杉醇是目前治療腫瘤有效的化療藥物。紫杉醇的作用機(jī)制在于通過與細(xì)胞骨架中微管蛋白結(jié)合，破壞微管的動力學(xué)穩(wěn)定性，使細(xì)胞周期阻滯于G2／M期，并最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡。但臨床上在使用紫杉醇進(jìn)行化療時，乳腺癌對紫杉醇的化療抵抗使紫杉醇

2、的藥效降低。TIMP1(tissueinhibitorofmetalloproteinase一1，基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑1)作為抑制凋亡的分子，與乳腺癌預(yù)后不良顯著相關(guān)。我們推測TIMP1通過抑制細(xì)胞凋亡降低紫杉醇對乳腺癌細(xì)胞的作用。為驗證此推論，首先，我們分別轉(zhuǎn)染TIMP一1表達(dá)質(zhì)粒以及對照克隆到乳腺癌細(xì)胞MCF7中，采用WestemBlot以及Elisa試驗檢測TIMP一1穩(wěn)定轉(zhuǎn)染克隆及對照克隆TIMP一1的表達(dá)情況。研究結(jié)果表明

3、，TIMP1穩(wěn)定過表達(dá)克隆T10和T13的TIMP1水平顯著高于對照克?。黄浯?，我們分別采用流式細(xì)胞儀以及細(xì)胞免疫熒光的方法檢測紫杉醇對不同克隆作用的情況。研究結(jié)果表明，TIMP1過表達(dá)克隆T10和T13的細(xì)胞凋亡百分率顯著低于對照克隆，且TIMP1過表達(dá)克隆G2／M期的比例顯著低于對照克?。辉俅?，我們進(jìn)一步研究TIMP一1對CyclinB1(調(diào)節(jié)細(xì)胞有絲分裂中期到后期轉(zhuǎn)變過程中關(guān)鍵性的細(xì)胞周期蛋白)的表達(dá)及其穩(wěn)定性的影響。研究結(jié)果表明