苦參堿對(duì)表皮葡萄球菌密度感應(yīng)系統(tǒng)AI-2信號(hào)分子的調(diào)控作用研究.pdf

1、長(zhǎng)期以來(lái)抗生素在治療細(xì)菌感染方面發(fā)揮著無(wú)可替代的作用，但是由于濫用和不合理使用抗生素導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生了嚴(yán)重的耐藥性，甚至出現(xiàn)了多重耐藥菌株。隨著對(duì)細(xì)菌耐藥機(jī)制深入研究發(fā)現(xiàn)耐藥性與細(xì)菌生物被膜的產(chǎn)生有很大的關(guān)系，細(xì)菌一旦形成生物被膜，其對(duì)抗生素的耐藥性比浮游菌增加了1000倍以上。細(xì)菌密度感應(yīng)系統(tǒng)在生物被膜形成過(guò)程中有重要的調(diào)控作用，其中AI-2信號(hào)分子扮演著重要的角色，因此密度感應(yīng)信號(hào)分子是消除細(xì)菌生物被膜的新靶點(diǎn)。本研究以密度感應(yīng)AI-2

2、信號(hào)分子為研究對(duì)象，探討其在表皮葡萄球菌生長(zhǎng)過(guò)程中的生成規(guī)律以及藥物對(duì)AI-2分子的作用特點(diǎn)，為研究中藥消除細(xì)菌生物被膜的機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
　　首先用不同的培養(yǎng)方式培養(yǎng)表皮葡萄球菌浮游和生物被膜兩種模式菌，分別用XTT法和分光光度計(jì)法測(cè)定生物被膜菌和浮游菌生長(zhǎng)曲線(xiàn);用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)兩種模式菌不同時(shí)間點(diǎn)luxS基因的轉(zhuǎn)錄水平;用哈維氏弧菌BB170作為報(bào)告菌株檢測(cè)兩種模式菌中AI-2分子的濃度，研究AI-2分子的濃度及l(fā)ux

3、S基因轉(zhuǎn)錄水平在兩種模式菌生長(zhǎng)過(guò)程中的變化規(guī)律;重點(diǎn)研究以苦參堿為主的中藥和抗生素對(duì)生物被膜菌以及對(duì)兩種模式菌中AI-2分子的調(diào)控作用;研究月桂酸單甘油酯、壬酸及苦參堿與二者組成的復(fù)合物聯(lián)合使用對(duì)生物被膜菌及生物被膜菌AI-2分子的作用特點(diǎn)。
　　結(jié)果表明AI-2分子和luxS基因轉(zhuǎn)錄水平在兩種模式菌生長(zhǎng)過(guò)程中有不同的變化規(guī)律:在浮游菌中AI-2分子變化規(guī)律和luxS基因轉(zhuǎn)錄水平與菌株生長(zhǎng)呈正相關(guān)，在生物被膜菌中AI-2分子變化規(guī)

4、律與生物被膜生長(zhǎng)規(guī)律基本一致，但是luxS基因相對(duì)表達(dá)量則與生物被膜生長(zhǎng)呈負(fù)相關(guān)。將試驗(yàn)藥物作用于兩種模式菌后發(fā)現(xiàn)藥物對(duì)AI-2分子有調(diào)控作用，藥物對(duì)浮游菌AI-2分子的抑制作用優(yōu)于對(duì)生物被膜菌AI-2分子的抑制作用，并且在兩種模式菌中中藥對(duì)AI-2分子的抑制作用優(yōu)于抗生素，試驗(yàn)藥物對(duì)生物被膜菌有一定的抑制作用而且中藥的抑制作用更好。月桂酸單甘油酯和壬酸及二者組成的復(fù)合物對(duì)生物被膜菌及生物被膜菌AI-2分子有抑制作用，并且該復(fù)合物與苦參