重要植物病原細菌的高通量分子檢測技術研究及應用.pdf

1、在植物的發(fā)病早期快速、準確鑒定出病原菌，以防止其傳播和流行、減少經濟損失具有重要的意義。發(fā)展快速、靈敏、高通量的分子檢測技術對提升我國植物病害控制水平，尤其是阻止外來農林危險生物入侵、保護我國農林經濟安全生產與生態(tài)安全有著重要意義。目前基于PCR技術的分子檢測方法無法滿足對大批量樣本檢測的需要，因此尋找其他的分子檢測靶標，發(fā)展植物病原菌高通量檢測方法，對完善病原細菌分子檢測技術、提升我國植物檢疫的技術水平和提升我國植物病害控制水平具有重

2、要意義。
　　 高通量是目前植物病原菌分子檢測的發(fā)展方向，而基于PCR擴增的普通分子檢測方法無法一次檢測多種病原菌。因此，發(fā)展高通量檢測方法對于農業(yè)生產和口岸檢疫具有重要意義。分子探針和DNA陣列技術等技術的出現為發(fā)展植物病原菌高通量檢測提供了新的思路和方法。Padlock探針是一種長的寡核苷酸探針，其兩端的序列可通過與靶標DNA序列互補配對而使探針結合成環(huán)狀。Padlock探針不僅具有非常高的特異性，同時還可與DNA陣列技術結

3、合進行高通量檢測。本研究設計了6種重要植物病原菌（Erwinia amylovora，Erwinia pyrifloiae，Pantoea stewartii subsp.stewartii，Acidovorax avenae subsp.citrulli，Xanthomonas oryzae pv.oryzae，Xanthomonas oryzaepv.oryzicola）的padlock探針，并對這些探針的特異性和靈敏度進行了驗證。