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文檔簡介
1、目的:探討蟲草素(Cordycepin)對膽囊癌細胞增殖及遷移的影響。
方法:MTT法檢測不同濃度的蟲草素抑制SNU308膽囊癌細胞體外增殖能力的影響;平板克隆形成實驗檢測不同濃度蟲草素對SNU308細胞集落形成能力的影響;劃痕愈合實驗和遷移實驗檢測蟲草素體外抑制膽囊癌細胞遷移的影響;流式細胞儀檢測蟲草素誘導(dǎo)細胞凋亡的影響;細胞免疫熒光實驗及蛋白印跡實驗檢測蟲草素誘導(dǎo)細胞自噬的影響。
結(jié)果:1.MTT檢測實驗結(jié)果顯示
2、:與對照組相比5μM、10μM、20μM、30μM的蟲草素處理組細胞增值率顯著受到抑制,并呈劑量依賴性(p<0.05)。2.平板克隆形成實驗結(jié)果顯示:10μM和20μM蟲草素作用于SNU308細胞7天后,均顯著抑制細胞集落形成(p<0.05)。3.流式細胞儀檢測結(jié)果顯示:20μM蟲草素可明顯誘導(dǎo)SNU308細胞的細胞凋亡。4.細胞免疫熒光檢測結(jié)果顯示:20μM蟲草素處理細胞24后,SNU308細胞的胞漿中LC3熒光顆粒的數(shù)量明顯增多,熒
3、光強度也顯著增強(p<0.05);蛋白印跡實驗結(jié)果顯示:與對照組相比,自噬相關(guān)標記物Beclin1蛋白的表達增高,促凋亡因子Bax蛋白表達增高,抑制凋亡因子Bcl-2蛋白表達下調(diào)。5.細胞劃痕實驗檢測結(jié)果顯示:與對照組相比,10μM、20μM蟲草素處理組的細胞遷移距離明顯縮短,并呈藥物濃度-時間依賴性(p<0.05);侵襲實驗結(jié)果顯示,經(jīng)蟲草素處理后細胞的遷移明顯受到抑制。
結(jié)論:1.蟲草素可抑制膽囊癌細胞增殖,其機制與誘導(dǎo)細
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